眼用微乳地塞米松的含量测定和稳定性研究

[摘要] 目的：建立HPLC测定地塞米松磷酸钠眼用微乳含量的方法并对其进行稳定性研究。方法：采用HPLC测定地塞米松磷酸钠眼用微乳的含量，同时对其进行稳定性研究。结果：地塞米松磷酸钠眼用微乳的含量符合规定，初步稳定性表明该制剂稳定。结论：地塞米松磷酸钠眼用微乳符合质量控制要求；HPLC法简便、快捷、灵敏，可作为其质量控制的有效方法。

[关键词] HPLC；地塞米松磷酸钠；眼用微乳；含量测定；稳定性

[中图分类号]R927 [文献标识码]B [文章编号]1673-7210（2009）01（c）-035-02

Determination and stability study of Dexamethasone Sodium Phospha Microemulsion for Ocular Application

CHEN Ming-yong1, XU Jing-xia2

（1.Forest Integrated Chinese and Modern Medicine Hospital of Yunnan, Kunming 650224,China; 2.The First People's Hospital of Yunnan Province, Kunming 650032,China)

[Abstract] Objective: To establish a HPLC method for the content determination of dexamethasone sodium phosphate in the ophthalmic emulsion, and test its stability. Methods: By HPLC dexamethasone sodium ophthalmic emulsion in the same time its stability study.Results: dexamethasone sodium ophthalmic met the required Microemulsions in the initial stability test. Conclusion: Dexamethasone sodium ophthalmic emulsion with quality control requirements，using HPLC is simple,fast,sensitive,and could be served as an effective means of quality control.

[Key words] HPLC; Dexamethasone sodium phosphate; Microemulsion; Content; Stability

地塞米松磷酸钠滴眼剂为眼科常用制剂，但地塞米松磷酸钠为光敏感物质，在生产和贮存过程中易发生光化降解反应，同时地塞米松在水中几乎不溶[1-2]。国内市售用于眼部炎症治疗的制剂主要有地塞米松磷酸钠滴眼液、地塞米松眼膏，国外还有地塞米松眼用混悬液。由于眼角膜屏障、泪液稀释和鼻泪管消除等原因，这些传统的眼制剂在眼角膜前区滞留时间短，眼部生物利用度往往较低（1%～10%），患者用药次数频繁，耐受性差[3]。微乳的主要优点是不良反应小、安全性高、可增大难溶药物的溶解性，提高易水解药物的稳定性[4]。近年来，国外以微乳为载体的眼用药物传递系统的研究正蓬勃兴起。本文在制备地塞米松磷酸钠微乳滴眼剂的基础上对其进行含量测定及稳定性研究，现报道如下：

1 仪器与试药

戴安高效液相Ultimate3000；变色龙工作站；NDJ-1型旋转粘度计(上海精密科学仪器有限公司)； AY220型电子天平(日本岛津公司)；Zetasizer H-3000激光粒度和电位测定仪(英国仪器有限公司)；涡旋混合器(上海医科大学仪器厂)；恒温水浴锅(常州国华电器有限公司)； 501超恒温水浴锅(上海恒温仪器厂)； TGL-16G型高速台式离心机(上海安亭科学仪器厂)；AY220型电子天平(日本岛津公司)。地塞米松磷酸钠对照品(130436-200501)，水为超纯水。

2 方法与结果

2.1 含量测定

2.1.1 色谱条件[5-6]色谱柱：Diamond C18(5μm，4.6 mm×150 mm)；流动相：甲醇-0.3%磷酸二氢钾(65∶35)；流速：1 ml/min；柱温：室温；检测波长：240 nm；进样量：20 μl。在该色谱条件下，地塞米松磷酸钠保留时间为4.95 min，色谱图见图1。

2.1.2 标准曲线制备取经减压干燥至恒重的地塞米松磷酸钠对照品约20 mg，精密称量，置50 ml容量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，即得对照品溶液。精密吸取对照品溶液0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 ml，分别置25 ml容量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，进样20 μl。以地塞米松磷酸钠的峰面积A对地塞米松磷酸钠浓度C(g/ml)进行回归，得回归方程为：A=29.783 2C-4.213 5，r=0.999 9。结果表明，地塞米松磷酸钠在8～80 g/ml范围内线性关系良好。

2.1.3 精密度试验取地塞米松磷酸钠浓度为40 g/ml的对照品溶液，按上述色谱条件重复进样6次，其峰面积测量值的RSD为1.26%，表明精密度良好。

2.1.4 稳定性试验取地塞米松磷酸钠浓度为40 g/ml的对照品溶液，按上述色谱条件分别在0、1、2、4、9、12 h进样，其峰面积测量值的RSD为0.25%，表明地塞米松磷酸钠对照品溶液在0～12 h内稳定。

2.1.5 重复性试验取同一批号样品(20050406)1 ml，共6份，分别置6只50 ml容量瓶中用流动相定容至刻度，按上述色谱条件进样。样品测定的RSD为0.72%，表明该方法重现性良好。

2.1.6 回收率试验模拟处方比例精确制备样品滴眼液，在线性范围内配成高、中、低3种浓度，按上述色谱条件测定，每个样品连续测定3次，共9次，计算回收率，平均回收率为100.65%，RSD为1.21%，结果见表1。

2.1.7 样品含量测定 精密吸取地塞米松磷酸钠眼用微乳1 ml，置25 ml容量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，进样20 μl，结果见表2。

2.2 稳定性研究[7]

2.2.1 影响因素试验分别取三批地塞米松磷酸钠微乳滴眼剂(20060802，20060805，20060806)经高温(60℃)、强光条件(4 500±500)lx下放置10 d，于5、10 d取出样品，测定pH值、平均粒径、地塞米松磷酸钠含量，结果见表3。

2.2.2加速试验分别取三批地塞米松磷酸钠微乳滴眼剂（20060802，20060805，20060806）在（40±2）℃、RH （75%±5%）条件下进行6个月，分别于0、30、60、90、180 d取样，测量地塞米松磷酸钠含量，结果见表4。

表4地塞米松磷酸钠微乳滴眼剂加速稳定试验结果（%）

2.2.3长期稳定试验分别取三批地塞米松磷酸钠微乳滴眼剂（20060802，20060805，20060806）分别在（25±2）℃、（6±2）℃条件下放置，分别于30、60、90、180、360 d取样，与0 d比较地塞米松磷酸钠的含量变化，结果见表5。

表5 地塞米松磷酸钠眼用微乳长期稳定试验结果（%）

3 讨论

本实验采用HPLC法测定地塞米松磷酸钠微乳滴眼剂的含量，地塞米松磷酸钠微乳滴眼剂与杂质分离良好，平均加样回收率为(103.2±3.2)％，方法可靠。地塞米松磷酸钠为光敏感物质，在生产和贮存过程中易发生光化降解反应，地塞米松磷酸钠滴眼剂为弱碱性制剂，因此选用亚硫酸钠作稳定剂，亚硫酸钠在抗氧化过程中产生酸性硫酸盐，使制剂的pH值下降。因此本品应分装于棕色塑料滴眼管内，以保持良好的稳定性。

[参考文献]

[1] 郑明兰,于迎春,管玫,等.0.1%地塞米松磷酸钠滴眼剂稳定性的探讨[J].华西医学,2000,15(2):23.

[2]费小凡,史月霞,陈玉.地塞米松磷酸钠滴眼液的光不稳定性[J].华西药学杂志,2000,6（12）:207-208.

[3]林艳琼,甘勇,甘莉.地塞米松眼用微乳的研究[J].中国药学杂志,2006,41(5):358-362.

[4] Jadhav KR, Shaikh IM, Ambude KW, et al. Applications of microemulsion based drug delivery system[J].Curr Drug Deliv,2006,3(3):267-273.

[5]国家药典委员会.中国药典(二部)[S］.北京:化学工业出版社,2005.185.

[6]邓显奇.HPLC测定利得视眼水中地塞米松磷酸钠的含量[J].广东药学,2005,6（12）:12-13.

[7]国家食品药品监督管理局.化学药物稳定性研究技术指导原则[S].2005.

（收稿日期：2008-10-21）