冬葵提取物对菜青虫杀虫活性研究

摘要:锦葵科植物冬葵(Malva verticillata L)是一种分布很广的两年生草本植物,自古作为治疗多种疾病的医药使用,而其农用活性却很少有人研究。菜青虫(Pieris rapae Linnaeus)是十字花科蔬菜大白菜、油菜等的主要害虫,该虫的防治工作也倍受人们关注。文章选取从冬葵萃取物为供试材料,分别测试了其不同萃取物对菜青虫幼虫的拒食作用和胃毒作用。

关键词:冬葵;萃取物;菜青虫;拒食作用;胃毒作用

中图分类号: S482.3+9 文献标识码:A 文章编号:1674-0432(2010)-08-0074-1

0 前言

锦葵科植物冬葵(Malva verticillata L)系两年生草本,生于平原旷地、村落附近、路旁、田埂、山脚或向阳坡较湿处,分布几乎遍布全国各地。葵可以治疗肝、脾、胃等内脏器官的不适,另外冬葵也可以治疗如关节胀满,血淋,热淋、胞衣不下、胎死腹中、蛇蝎螫伤等症。至宋元明清,冬葵的药用更是普及和广泛。通过以上考证可以看出,冬葵是一种易得、价廉,能治疗内、外、妇、儿等多种疾病的药物。本文通过对冬葵的多种溶剂萃取物对菜青虫胃毒作用作了初步的研究,以期探索菜青虫的其他防治途径。

1 材料与方法

1.1 材料

菜青虫(Pieris rapae Linnaeus),西北农林科技大学无公害农药研究服务中心养虫室(T:25±1℃,RH:75%±5%;D/L:12:12)提供,试验时挑取生长发育状态一致的健康5龄初期幼虫供试。

植物样品由西北农林科技大学无公害农药研究服务中心提供。提取时采用工业溶剂重蒸馏分,少量样品的分离纯化及生物测定时采用分析纯试剂,所用试剂均由西安化学试剂厂生产。

1.2 方法

1.2.1 冬葵萃取物样品的制备 对5kg的冬葵全株粉碎样品用95%的工业乙醇渗漉提取,浓缩得乙醇浸膏,加水悬浮后,再依次用石油醚(30-60℃)、乙酸乙酯、正丁醇分别萃取,减压浓缩萃取液得三种萃取物浸膏,分别用大写字母PEE、EAE、NBAE表示。其萃取率见表1。

表1 冬葵大量样品提取及初步萃取分离结果

提取样品 萃取物重量(g) 提取率(%)

乙醇浸膏 624 12.48

石油醚浸膏 94 1.880

乙酸乙酯浸膏 95.5 1.910

正丁醇浸膏 12 0.240

从表1可知,使用提取溶剂为乙醇时,样品的提取率为12.48%。萃取物中以乙酸乙酯、石油醚为溶剂萃取率较高,为1.91%和1.88%,正丁醇最低,为0.24%,结果表明冬葵中低极性的物质含量较高。

1.2.2 生物活性测定方法 采用小叶碟添加法测定对粘虫的生物活性,记录试虫取食的叶碟数量,并于24、48统计取食总量,并计算试虫死亡率。

2 结果与分析

由于作者曾分别用三种萃取物测定了对三龄粘虫幼虫的拒食和胃毒活性,结果发现乙酸乙酯浸膏部分的生物活性较差,因此分别测定了石油醚萃取物和正丁醇萃取物对5龄菜青虫幼虫的拒食和胃毒活性,结果见表2、表3。

表2 冬葵不同溶剂萃取物对菜青虫的拒食活性测定结果

样品 取食叶面积(cm2/头) 拒食率(%)

24h 48h 24h 48h

PEE 0.29 0.51 9.38 13.56

NBAE 0.12 0.18 62.50 69.49

CK 0.32 0.59 - -

注:每处理试虫为10头,表中所列数据为3次重复的平均值;所有供试样品浓度均为1mg.mL-1。

表2是处理后48小时冬葵全株的石油醚和正丁醇两种萃取物对5龄菜青虫幼虫的非选择性拒食活性作用测定结果,可以看出石油醚萃取物、正丁醇萃取物对5龄菜青虫幼虫均有较高的拒食活性,萃取物对试虫拒食活性的大小,就其萃取溶剂而言依次为:正丁醇>石油醚。结果表明冬葵中对粘虫有拒食活性的物质主要分布在高极性的正丁醇萃取物中。

表3 冬葵全株提取样品对菜青虫幼虫的胃毒活性测定结果

样品 死亡率(%) 化蛹率(%) 羽化率(%)

1d 3d 5d 7d 10d 10d 10d

CK 0 0 0 10 10 90 90

PEE 3.33 6.66 10.00 53.33 53.33 33.33 26.67

NBAE 3.33 13.33 63.33 63.33 63.33 36.67 36.67

注:每处理试虫为10头,表中所列数据为3次重复的平均值;所有供试样品浓度均为1mg.mL-1。

从表3可以看出,在供试浓度下石油醚萃取物和正丁醇萃取物对菜青虫都有一定的胃毒活性,胃毒活性大小顺序为:正丁醇>石油醚;正丁醇萃取物仍然具有较高的毒杀活性(63.33%),但对其化蛹和羽化影响不大,即10天后仍存活的试虫全部化蛹,并且都能够正常羽化;而石油醚萃取物虽然胃毒活性不如正丁醇萃取物,只有53.33%,但10天后存活的菜青虫只有33.33%化蛹,并且化蛹后羽化也不完全(26.67%)。

3 结论

本试验采用小叶碟添加法对菜青虫胃毒作用试验,分析72小时的统计结果,发现正丁醇萃取物的胃毒活性最大,其校正死亡率为63.33%。结果表明:冬葵正丁醇萃取物对菜青虫有较强的毒杀作用;同时实验表明冬葵萃取物对菜青虫的生长发育也有较大影响。