蓖麻毒素粗提物杀线虫的生物活性分析

摘要：对蓖麻毒素粗提物进行室内杀虫效果研究。实验结果表明，在室内条件下，经过纯化的蓖麻毒素具有一定的杀线虫作用。不同浓度的蓖麻毒素粗提物对黄瓜根结线虫的杀虫率间存在明显差异，当试验浓度为50倍和100倍液时杀虫效果为85%和80%。

关键词：蓖麻毒素；粗提物；杀线虫活性；黄瓜根结线虫

中图分类号： S889+.2 文献标识码： A 文章编号： 1674-0432（2013）-16-23-1

寻找有效提取蓖麻饼中毒素并制成杀虫剂，使脱毒蓖麻饼做优良饲料的方法将会极大地提高蓖麻资源的综合利用程度，产生更大的经济、社会和生态效应。

本研究目的在于蓖麻毒素对根结线虫具备的杀虫活性物质和作用机理做定性研究。

1 材料与方法

1.1 实验材料

蓖麻毒素粗体取物的来源：蓖麻饼。

供试线虫：在大棚采集的黄瓜根结线虫。

1.2 主要仪器和药品

电子天平、大三角瓶、100目双层筛布、植物标本样品粉粹机、培养皿、量筒、烧杯、剪刀、挑针、放大镜、电子显微镜等

1.3 实验方法

蓖麻毒素粗提物杀线虫的方法。

蓖麻毒素粗提物的制备：将蓖麻饼在植物标本粉粹机中粉碎，定量称取粉碎的蓖麻饼粕，然后放入试剂瓶中，按照1∶50，1∶100，1∶150，1∶200的比例，分别加入自来水，浸泡1～3小时，过滤后得到约50倍、100倍、150倍、200倍的不同浓度的各种蓖麻毒素粗提物的溶液备用。

线虫的分离方法：贝曼漏斗法：取土样用2层纱布包好放入漏斗，加水漫过、浸透，静置10～12小时，用空烧杯接漏斗流出来的水，放至体视显微镜下观察。然后用挑针挑出特征明显的根结线虫，用无菌水冲洗、灭菌。然后接种于PDF培养基培养的灰葡萄菌丝上，置于25℃培养箱中培养，10天后分离出线虫，备用。

处理方法：浸泡法处理黄瓜根结线虫。

分别取4ml贝曼漏斗法得到的线虫滤液，各分别加入4ml的50倍、100倍、150倍、200倍蓖麻饼粕水滤液。观察虫体状态，并于24h、48h、72h后分别观察虫体状态，分别检查死虫数、活虫数，计算死亡率及校正死亡率。

死亡判别方法：在各浓度的蓖麻饼粕处理液中，虫体由活跃的弯曲状态变为伸直的沉淀状态。

死亡率计算方法：

死亡率（%）=（死亡虫体数/供试总虫数）×100

校正死亡率（%）=[（处理区虫口死亡率-对照区虫口死亡率）×100]/（100-对照区虫口死亡率）

处理1、2、3、4分别是50倍、100倍、150倍、200倍的蓖麻毒素粗提物滤液对黄瓜根结线虫进行浸泡处理。每处理重复三次，取平均值，清水对照。

注：a-d代表5%水平差异显著性；A-D代表1%水平差异显著性

Note：a-d are significance of difference in the p=0.05；

A-D are significance of difference in the p=0.01

2 结果与分析

由表1可见，蓖麻毒素粗提物不同浓度间杀线虫效果存在差异。各处理表现了较好的杀虫效果，浓度越大，杀虫效果越好，50倍液和100倍液对黄瓜根结线虫的杀虫活性较好，施药48h后黄瓜根结线虫校正死亡率分别为76.5%和70.6%。72h后黄瓜根结线虫校正死亡率分别为81.3%和75%。这种作用效果正好符合生物杀虫剂对害虫作用的一般规律。在蓖麻毒素粗提物滤液对黄瓜根结线虫进行浸泡的各处理中，根结线虫在1～2min内即由活跃状态变得活动减慢，表现为击倒性比较强，而且持效性较好，这种药效好但毒性低的生物农药适合于蔬菜作物上使用。

由表2可见72h后，处理1和处理2间无极显著差异，处理1和处理3及处理4间呈极显著差异。

3 小结讨论

在该实验过程中，随着蓖麻毒素粗提物浓度的增大，对线虫的杀虫效果越来越好；该实验虽然粗提物未经纯化，有效成分含量过低、剂型未通过改良优化，50倍液处理的杀虫效果高达85%，仍具有理论研究意义和实际应用价值。

参考文献

[1]闵建华.蓖麻饼作畜禽饲料的应用研究概况[J].饲料工业，1990，（11）：8.

[2]商务部教材编写组.油料生物化学[M].哈尔滨：黑龙江科技出版社，1982，11-15.

[3]傅福勒.中国蓖麻资源开发利用和对策[J].广西蚕业，1998，35（3）：55-56.