布鲁氏菌S19疫苗免疫奶牛血清凝集抗体的动态变化与水解素皮肤变态反应相关分析

摘要：观察奶牛在布鲁氏菌S19疫苗免疫状态下血清凝集抗体的动态变化规律和免疫后奶牛对布鲁氏菌水解素的皮肤迟发性变态反应差异，并探索两者的相关性，寻找选择布鲁氏菌病抗性牛的方法。选择布病阴性的性成熟青年黑白花奶牛50头，注射S19疫苗1×109 CFU/头，定期采集血液测抗体水平，第60天用布鲁氏菌水解素皮内注射，检测变态反应。结果显示，所有免疫牛均能在15天时检测到凝集抗体，30天达到峰值。迟发性变态反应表明，免疫牛对布鲁氏菌水解素具有良好的敏感性，变态反应强度与抗体峰值水平存在相关性，但差异不显著，相关系数为0.235。

关键词：奶牛；布鲁氏菌；凝集抗体；变态反应

中图分类号：S852.4+5文献标识号：A文章编号：1001-4942（2013）02-0011-04

布鲁氏杆菌病是一种广泛流传的重要的动物传染病。在多数宿主动物中主要表现为流产。依据对宿主的偏好性可以将其分为9个主要种，其中6个经典种包括：Brucella melitensis（羊种）， Brucella abortus （牛种）， Brucella suis （猪种）， Brucella canis （犬种）， Brucella neotomae （沙林鼠种）， Brucella ovis （绵羊附睾种）。根据培养和生物学特性又将这6个种划分为18个亚型。最近又鉴定到3个新种，分别为B. microti（田鼠型），Brucella pinnipediae（鳍型）和 Brucella cetacea（鲸型）。这些种主要感染山羊、牛、猪以及绵羊等[1]。

世界上约有101个国家和地区的牛有布病流行。目前在我国31个省市区中有25个省市区的人、畜有布病存在和流行。我国受布病威胁的人口约有3.5亿。人间布病发病率的回升与动物布病的发病率呈正相关，这些数据表明，我国动物布病的危害非常严重[2]。

致病布鲁氏菌通过在胎盘滋养层定殖引起雌性动物流产以及雄性动物不育。人感染B. abortus 或B. Melitensis后表现不同的症状甚至威胁生命。该病的确诊主要依靠在流产的组织、分泌物中分离出布鲁氏菌来确认[3]。疑似病例的诊断一般采用血清学反应来进行诊断： 孟加拉玫红试验、玻片凝集试验，补体结合试验或酶联免疫吸附法（ELISA）等。然而，由于凝集抗体的消失，还没有一种血清学方法能很好地检测个体或群体流行情况下的布病的存在。间接ELISA或乳汁环状试验在检测批量的乳牛布鲁氏菌时还是很有效的。但是乳汁环状试验检测大量的兽群布病的结果却不太可信[4～6]。

布鲁氏菌素皮肤试验又称变态反应试验，主要检测机体变态反应水平的高低。因为变态反应一般在感染后20～25天出现，因此不宜做早期诊断。本方法主要用于动物的大群检疫。本实验具有极高的特异性，布鲁氏菌素阳性而血清学阴性的动物可视作感染动物。但布鲁氏菌素试验不能检出所有感染动物个体，因此，在国际贸易中不能单独作为正式的诊断试验，而应有可靠的血清学试验进一步证实。皮内注射布鲁氏菌素可诱导细胞反应的暂时性无应答，因此同一动物两次检查之间应间隔6周以上。布鲁氏菌作为胞内寄生的细菌，能诱导机体发生变态反应，该方法也是判断动物是否感染布鲁氏菌的经典方法之一[7，8]。

目前评价布病疫苗效果的主要方法仍是攻毒实验，这是一种耗时而昂贵的评价手段。如何利用抗体水平、变态反应强度或二者结合评价布病疫苗的免疫效果，是布病疫苗研究领域中值得探讨的课题之一。本实验用布鲁氏菌疫苗免疫奶牛，分析了奶牛在免疫情况下抗体水平和变态反应强度之间的相关性，为布病的防控和疫苗评价提供技术方法。