糖肾复元汤对大鼠早期糖尿病肾脏损害疗效的实验研究

[摘要] 目的：观察糖肾复元汤对链脲霉素(STZ)糖尿病肾病大鼠的疗效。方法：采用STZ糖尿病肾病大鼠模型,分为正常组、对照组、糖肾复元汤治疗组。观察各组大鼠治疗前后的一般状况、血糖、血浆蛋白、肾功、尿蛋白等指标的变化。结果：与对照组比较,糖肾复元汤治疗组大鼠一般状况改善较好,血糖增高较少(P

[关键词] 糖肾复元汤；糖尿病肾病；STZ糖尿病肾病大鼠模型；实验研究

[中图分类号] R256.5[文献标识码]A [文章编号]1673-7210（2008）08（c）-030-03

Experimental research on the treatment of DN with Tangshen Fuyuan Decoction

CHEN Ji-de1,SI Ting-lin1, HOU Hui-zhen1,MENG Qin1,GAO Lian-ying1,WANG Ming-qin1,CHEN Chen2

(1.The Second affiliated hospital of Shandong University of Traditional Chinese Medicine,Jinan250001,China；2.Class 2, Grade 2006 Clinical Medicine, Shandong University，Jinan250011,China)

[Abstract] Objective:To observe Tangshen Fuyuan decoction's effect on DN rats due to STZ. Methods:Dividing rats of STZ diabetic nephropathy model into three groups: normal, control, Tangshen Fuyuan decoction group. Observing index changes of general condition, blood glucose, plasma protein、renal function、urine protein before and after treatment in all groups. Results:To compare with the control group, the rats in Tangshen Fuyuan decoction group has better recovered with blood glucose increasing less(P

[Key words] Tangshen Fuyuan decoction;DN;STZ DN rats model;Experimental research.

糖尿病肾病（diabetic nephropathy，DN）是糖尿病的主要并发症之一。主要病理变化是肾小球基底膜(GBM)增厚和以肾小球系膜区为主的细胞外基质(ECM)积累，导致弥漫性或结节性肾小球硬化。控制血糖、降低尿蛋白及抑制蛋白非酶糖化可延缓糖尿病肾病的发生[1]。本研究观察糖肾复元汤对糖尿病肾病大鼠血糖、尿蛋白、肾功能以及肝脏蛋白合成的影响，以证明该方疗效并探讨其作用机制。

1材料和方法

1.1试验材料

1.1.1试验用药糖肾复元汤：由黄芪、太子参、白术、葛根、桑寄生、鬼箭羽、当归、石韦、虎杖、菟丝子、地龙、黄柏、黄连、砂仁、枳壳组成，经常规煎煮、过滤、水浴蒸发至每毫升含生药材2 g，置于4℃冰箱保存备用。

1.1.2试验动物Wistar系雄性大白鼠30只(清洁级),体重(150±12) g，由山东省卫生防疫站实验动物中心提供（证书号000105）。

1.1.3试剂链脲霉素（streptozotocin，STZ）Sigma公司生产。

1.2试验方法

1.2.1模型制备应用腹腔内注射链脲霉素（streptozotocin，STZ）60 mg/kg复制糖尿病肾病大鼠模型。大鼠先适应性喂养1周，示正常生长后称重,经尿糖、尿蛋白定性检测为阴性后，随机抽取6只作为正常组。其余为治疗组、对照组并造模。造模前禁食24 h，临用前链脲霉素（streptozotocin，STZ）溶入0.1 mmol/L枸橼酸液中，按60 mg/kg腹腔注射。造模后称体重,观察饮食、饮水量，3 d后测尾静脉血糖≥16.7 mmol/L者,确定糖尿病模型形成。再继续喂养1周,随机抽取2只测尿微量白蛋白。尿微量白蛋白>15 μg/ml,确定DN模型形成。造模成功后随机分为2组,随机确定为治疗组10只，给糖肾复元汤煎液2 ml(含生药25 g/kg)灌胃(A组)；对照组9只，给蒸馏水2 ml灌胃（B组），造模成功率79%。以上给药2 次/d,共8周。正常组大鼠腹腔注射相同体积的不含STZ的柠檬酸盐溶液(C组)。正常组大鼠测上述观察指标，测得平均Glu为5.06 mmol/L，尿蛋白（-）。

大鼠每3~4只放在一只喂养笼中，给普通饲料，饲料由山东省卫生防疫站实验动物中心提供，收集鼠尿做试验时则每只大鼠放在一个取样笼中。饲料和自来水定时供给，自由摄取。大鼠分笼饲养后即收集24 h尿液、尾静脉采血检测相关指标作为实验前数据，给药治疗8周后收集24 h尿液，尾静脉采血做各种测定。

1.2.2观察指标及检测方法

1.2.2.1一般状况。观察并记录实验期间各组大鼠摄食饮水情况、精神状态、活动度、反应性、毛色、二便、体重变化及存活数等。

1.2.2.2血糖、血脂、血浆蛋白、肾功用生化自动分析测定(奥林巴斯生化仪2700)。

1.3.统计学方法

采用t检验。

2结果与分析

2.1造模成功与否分析

A、B组大鼠血糖值经注射STZ后3 d，实验鼠血糖≥16.7 mmol/L，表明糖尿病模型是成功的[2]；继续喂养1 周，尿微量白蛋白>15 μg/ml，近似糖尿病肾病形成。

2.2一般状况

实验期间C组大鼠全部存活,毛色光亮、反应性良好,二便正常。A组在造模后第40 天死亡1只,其余9只与C组比较形体偏瘦,精神欠佳,反应稍迟钝,毛色欠光亮,摄食稍增多,饮水及尿量增多,大便成形。B组有3只大鼠自尾静脉采血后,断尾处伤口红肿溃烂,于造模后第20、29、45 天死亡3只，第3只在第40 天因白内障失明，主动摄食困难；剩余6只大鼠明显消瘦，精神萎靡，反应迟钝，毛色枯槁，尾部及足掌部紫红；饮水及摄食、尿量明显增多，大便稀。

2.3治疗前后各组大鼠体重变化

结果见表1。

A组、B组与C组比较治疗后体重增加均明显减少,有极显著性差异(P

2.4治疗前后各组大鼠血糖、血脂的变化情况

见表2。

治疗后A组、B组血糖明显升高(P

２.5治疗后各组大鼠血浆蛋白、肾功能的比较

见表3。

治疗后A组、B组血浆蛋白较C组皆有一定的降低，但A组与C组比较无统计学意义；A组与B组比较有极显著性差异(P

2.6治疗后各组大鼠尿蛋白漏出情况比较

见表4。

治疗后A组、B组尿蛋白漏出较C组皆有显著的增加，但A组漏出较少，与B组有显著性差异（P

3讨论

糖尿病肾病(DN)是糖尿病常见的严重并发症之一,随着糖尿病发病率迅速增高,DN的发病率也逐年上升,目前已成为终末期肾病(ESRD)的重要病因。DN的原发病是糖尿病，属于中医“消渴水肿关格”等范畴。因消渴阴虚燥热日久，耗气伤津，阴损及阳，终成阴阳两虚，肺脾肾诸脏俱损，气滞血瘀，脉络瘀阻而发变证。肾阴阳两虚、元气衰竭是DN发病之本，而肾络瘀阻是DN发病的重要因素[3]。针对虚实并见，气血阴阳并损的病理特点，应该坚持扶正祛邪，标本兼治的原则。因此我们提出益肾复元法，选用补阳还五汤、二妙散化裁组成糖肾复元汤来治疗DN，通过初步临床观察，获得较好的效果。该方用黄芪、太子参、白术、当归益气养血共为君药。葛根、桑寄生、菟丝子、鬼箭羽、虎杖通阳益阴、生津活血共为臣药。石韦、黄柏、黄连、地龙清热利湿泄浊共为佐药。砂仁、枳壳健脾理气兼具佐使之用。现代药理研究证明，黄芪有扩张血管，改善血液循环，增强机体免疫功能，提高机体抗病能力，促进机体代谢等作用；当归能扩张小动脉，改善微循环和保护血管内皮细胞，增加心脑肾血流量，降低心肌耗氧量，防治动脉硬化和心脑肾缺血缺氧等作用；地龙有扩张血管，降低血压，降低血脂，抗栓溶栓之效等等[4]。另外现代医家的大量研究证实黄芪、当归具有良好的免疫调节功能和促进肝脏合成蛋白的功能，在肾病综合征、慢性肾炎的治疗中被广泛使用且效果确实[5,6]。全方具有益气养血、滋阴扶阳、活血通络之效，适用于DN之气阴两虚、肾阴阳两虚，瘀血阻络证候。本实验结果表明，糖肾复元汤能有效延缓STZ诱导的大鼠DN的发展，能改善其一般状况，降低血糖，减少尿蛋白漏出，改善肾功能，促进肝脏蛋白合成。对延缓DN的进展有较好的防治作用。

[参考文献]

[1]Kanauchi M,Nishioka H, Dohi K.Serum levels of advancedglyco sylation end products in diabetic neph ropathy[J].Nephron,2001,89:228-230.

[2]于德民，吴锐，尹雄，等.试验性糖尿病动物模型的研究[J].中国糖尿病杂志，1995，3：5.

[3]吕仁和.糖尿病及其并发症中医诊治学[M].北京：人民卫生出版社,1997.528－529.

[4]阴健，郭力弓.中药现代研究与临床应用[M].北京：学苑出版社.1994.1.

[5]汪德清，沈文梅，田亚平，等.黄芪的两种提取成分对氧自由基作用的影响[J].中国药理学通报,1994,10(2):129-132.

[6]王海燕，李惊子，潘缉圣，等.中药黄芪当归合剂对肾病综合征肾损伤的保护作用及对代谢紊乱的影响[J].北京大学学报（医学版），2002，34（5）：542－552.

（收稿日期：2008-05-26）

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