DEL血型鉴定

【关键词】DEL；血型

Rh血型根据D抗原是否凝集分为阳性和阴性2大类，阳性中包括正常D和变异D，而变异D中又含弱D、部分D和D放散型（DEL）等。DEL红细胞膜D抗原非常弱，常规间接抗球蛋白试验（IAT）测定为阴性，只有通过敏感的吸收放散试验才能检出。我们采用血清学方法筛选，基因分型技术验证来检测DEL血型。

1资料与方法

1.1研究对象2013年1月――3月辽宁省血液中心经3批间接抗球蛋白试验确证Rh（D）阴性的无偿献血者50例。

1.2试剂抗球蛋白试剂（批号：20050102-20081105，上海血液生物医药有限责任公司）、3批抗-D试剂均为单克隆人抗-D[分别是NovacloneTM Anti-D，Bioscot Monoclonal IgM+IgG TH-28/MS-26，和上海血液生物医药有限责任公司的IgG-D（20080401）]；GoTaq（TaKaRa公司）和DEL特异性引物（TaKaRa公司）。

1.3Rh（D）阴性确认实验参考文献[1]方法，对50例Rh（D）阴性无偿献血者进行Rh（D）阴性确认实验。

1.4DEL吸收放散试验具体实验方法参见文献[2]方法。

1.5DEL基因分型DEL特异性引物设计及具体实验方法参见文献[3]方法，产物通过2%琼脂糖凝胺电泳，150V、20min紫外灯下观察结果。

2结果

2.1Rh（D）阴性鉴定50例献血员经3批不同批号抗-D检测，盐水和抗球蛋白试验均是阴性。

2.2DEL吸收放散试验间接抗球蛋白试验确证Rh（D）血清学阴性的50例献血者中，吸收放散试验阳性11人，阳性比例22.00%。

2.2DEL基因分型11例吸收放散试验阳性样本采用DEL特异性引物基因分型，均为阳性。DEL基因分型电泳图见图1。

3讨论

DEL型发现于1984年，与欧洲、非洲人群不同，亚洲Rh阴性人群中DEL表型的比例很高，如在高加索人中约为0.16%[4]，黑人中尚未观察到，而在中国汉族Rh阴性人群中比例高达26%左右[5]。我们对经3批不同间接抗球蛋白抗-D试剂确证为Rh（D）阴性的50献血者，11例吸收放散试验检测为DEL阳性的献血者，DEL频率为22.00%。与文献[4]报道结果相近。

DEL血型是Rh血型中一个重要血型，DEL患者输血和DEL女性妊娠是一个非常值得研究的问题。目前国际上，包括我国均不检测DEL型，将其视为Rh（D）阴性供者或受者。国外已有DEL胎儿或红细胞免疫Rh（D）阴性孕妇和Rh（D）阴性受血者由于输入DEL表型血液，而产生抗-D的病例报道[5-8]。因此准确而高效地检测DEL表型，是提高临床输血安全性的重要手段[9]。

参考文献

[1]叶应妩，王毓三，申子瑜，等.全国临床检验操作规程.南京：东南大学出版社，2006：258-261.

[2]吴俊杰，洪小珍，马开荣，等.浙江汉族DEL表型基因分型方法的建立.中国实验血液学杂志，2006，14（5）：1017-1019.

[3]章旭，林凤秋，李剑平，等.DEL型个体抗体筛选的调查分析.中国输血杂志，2009，22（10）：796-799.

[4]Wagner FF，Frohmajer A，FlegEL WA.RHD positive haplotypes in D negative Europeans.BMC Genet，2001，2（1）：l0-10.

[5]Shao CP，Maas JH，Su YQ，et al.Molecular background of RhD-positive，D-negative，Del and weak D phenotypes in Chinese.Vox Sang，2002，83（2）：156-161.

[6]Gassner C，Doescher A，Drnovsek TD.et a1.Presence of RHD inserologically D-，C/E +individuals：a Europea n multicenter study.Transfusion，2005，45（4）：527-538.

[7]Wagner T，KonTDc GF，Buchta C，et al.Anti-D immunization by DEL red blood cells.Transfusion，2005，45（4）：520-526.

[8]Yasuda H，Ohto H，Saktuna S，et al.Secondary anti-D immunization by Del red Blood cells.Transfusion，2OO5，45（4）：1581-1584.

[9]李勤，叶璐夷，郭忠慧，等.中国人群中Del表型分子背景研究.中华医学遗传学杂志，2006，23（5）：486-491.