多花黄精中多糖的免疫活性研究

摘 要 目的：研究多花黄精中多糖的免疫活性作用。方法：将小鼠随机分组设计实验组和对照组，测定多花黄精中多糖对小鼠免疫功能的影响。结果：多花黄精中多糖可提高小鼠腹腔巨噬细胞吞噬百分率和吞噬指数；增加小鼠溶血素的生成；增加小鼠的脏器指数。结论：多花黄精中多糖具有增强小鼠免疫功能的作用。

关键词 多花黄精 多糖 免疫功能

黄精为百合科黄精属多年生草本植物的干燥根茎，味甘，性平，无毒，是中国传统的药食同源性中草药。2005版《中国药典》收载了黄精、囊丝黄精（多花黄精）或滇黄精的干燥根茎入药。药理学研究证明黄精中的黄精多糖具有增强免疫、抗炎、抗病毒等多种功能［1］。因此对当地多花黄精的免疫作用进行了相关研究，为多花黄精的进一步开发利用提供依据。

资料与方法

主要材料：多花黄精为淮北市人民医院中药科采购，产地安徽，由安徽师范大学生命科学院专家鉴定为百合科植物多花黄精的根茎；小白鼠来源于淮北市药品检验所实验室，实验过程中对动物处置方法符合科学技术部2006年的《关于善待实验动物的指导性意见》［2］。

仪器及试剂：高效液相色谱系统；岛津UV-1601紫外可见分光光度计；玻璃匀浆器；XSP-44X9型生物显微镜；流式细胞仪；高压锅MLS-3780；环磷酰胺；黄酒（酒精度≥12%）；葡萄糖、95%乙醇、石油醚、氯仿、乙醚、丙酮等均为分析纯，补体，重蒸水，生理盐水。

方法：⑴黄精多糖的提取：取多花黄精3kg，加600g黄酒于不锈钢锅中炖制25小时，得酒炖黄精样品。将样品干燥、粉碎、过筛，取粉末样品，分别加10和7倍量体积分数80%乙醇2次超声，每次30分钟，过滤后合并滤液，减压回收滤液至无醇味，蒸馏水定容至3000ml，过滤。滤液过D101大孔吸附树脂柱，收集水洗液，浓缩至干燥，得到多糖。用高效液相色谱法检测，发现样品中主要含有果糖、葡萄糖、蔗糖等多糖成分。⑵黄精多糖对小鼠免疫功能的影响：①对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响：取小鼠40只，随机分4组：高、中、低剂量组（400、200、100mg/kg）和对照组。每天给药1次，灌服量10ml/kg，对照组给予等体积生理盐水，连续给药7次，末次给药后1小时每只鼠腹腔注射5%鸡红细胞混悬液0.4ml，再给鸡红细胞，4小时后处死小鼠，按文献方法测腹腔巨噬细胞的吞噬功能［3］。②黄精多糖对小鼠溶血素生成的影响：取小鼠40只，随机分4组：高、中、低剂量组（400、200、100mg/kg）和对照组，对照组给予等体积生理盐水。每天给药1次，连续10天；给药后第3天每鼠腹腔注射5%鸡红细胞生理盐水混悬液0.2ml进行免疫，免疫后第7天眼眶取血，离心，取血清用生理盐水稀释100倍，取稀释后血清lml，5%鸡红细胞混悬液0.5ml，10%补体0.5ml混合，在37℃恒温孵育30分钟，0℃冰箱中中止反应，离心，取上清液于紫外可见光谱仪540nm处比色，测OD值［4］。③黄精多糖对小鼠免疫器官的影响：采用脏器指数法，取小鼠50只，随机分5组：高、中、低剂量组（400、200、100mg/kg）、对照组和模型组。适应3天后，除对照组外，其他各组小鼠尾静脉给环磷酰胺0.2ml造模，每天灌胃给药1次，连续10天。末次给药后24小时，颈椎脱臼处死小鼠，破开腹腔、胸腔，剥取胸腺、脾脏、肾，称质量。按下式计算免疫器官胸腺、脾脏等脏器指数并比较各组间的差异：胸腺指数胸腺质量/体重×100%；脾脏指数脾脏质量/体重×100%；肝指数肝脏质量/体重×100%。

统计学分析：采用SAS9.0软件进行单因素方差分析，定量资料数据用（X±S）表示，组间比较采用t检验。

结 果

黄精多糖对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响。给药组中小鼠腹腔巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬百分率及腹腔巨噬细胞的吞噬指数高于对照组（P＜0.05），见表1。

黄精多糖对小鼠溶血素生成的影响。给药组小鼠溶血素生成的OD值均显著高于对照组（P＜0.05），见表2。

表2 黄精多糖对小鼠溶血素生成的影响（X±S，n10）

注：*>/sup>P＜0.05。

黄精多糖对小鼠免疫器官的影响。各给药组的脏器指数明显高于模型组（P＜0.05），见表3。

讨 论

研究发现黄精具有增强免疫、降血脂、降血糖、延缓衰老等多种作用。体外实验表明黄精多糖可直接作用于红细胞［5］，增强红细胞膜Cab受体活性，使红细胞免疫黏附功能增强。

本实验研究表明可促进小鼠溶血素生成，说明可增强小鼠体液免疫功能。而黄精多糖对免疫器官的影响，主要表现为免疫器官（胸腺、脾脏）重量的增加，结果显示，其对胸腺指数的影响明显大于肝脏和脾脏指数，各给药组脏器指数明显高于模型组，通过建模得到受损伤脏器，而给药组脏器指数相对模型组都有极大的改善，大部分给药组脏器指数均高于正常组，说明它能改善环林酰胺造成的脏器损伤，修复作用较好。

本研究进一步证实黄精具有宽中益气、补肾益精、滋阴润肺、生津补脾等功效，也提示黄精中多糖可能是较好的免疫调节剂。黄精多糖作用广泛，有进一步研究开发利用的价值。

参考文献

1 中华人民共和国药典委员会编.中华人民共和国药典（2005年版1部）［S］.北京:化学工业出版社,2005:215.

2 中华人民共和国科学技术部.关于善待实验动物的指导性意见,2006.

3 张庭廷,夏晓凯,陈传平,等.黄精多糖的生物活性研究［J］.中国实验方剂学杂志,2006,12（7）:42-45.

4 彭勃,苗明三,郭会军,等.扶正排毒片十预环磷酰胺致免疫抑制小鼠免疫功能的效应［J］.中国组织工程研究与临床康复,2006,10（43）:126-128.

5 王红玲,张渝侯,洪艳,等.黄精多糖对哮喘患儿红细胞免疫功能影响的体外实验研究.中国当代儿科杂志,2002,4（3）:233-235.

表1 黄精多糖对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响（X±S，n10）

注：*>/sup>P＜0.05。

表3 黄精多糖对小鼠免疫器官的影响（X±S，n10）

注：*>/sup>P＜0.05。