HPLC法测定龙胆泻肝片中栀子苷的含量

[摘要] 目的：建立龙胆泻肝片中栀子苷的含量测定方法。方法：采用HPLC法测定，Shimpack VP-ODS C18（4.6 mm×250 mm，5 μm）为色谱柱，乙腈-水（13∶87）为流动相，检测波长为238 nm，流速为1.0 ml/min。结果：栀子苷线性范围0.102 4~0.716 8 μg；平均回收率为99.58%，RSD为1.24%。结论：HPLC法可以用于龙胆泻肝片中栀子苷的含量测定。

[关键词] 龙胆泻肝片；栀子苷；HPLC

[中图分类号]R917 [文献标识码]A [文章编号]1673-7210（2008）04（a）-034-02

Content determination of jasminoidin in Longdan Xiegan Tablets by HPLC

LIU Tian-zhu 1, MO Jie-li2

(1.China Southern Airlines Company Limited Aviation Hygiene Center,Guangzhou 510405,China; 2.Guangdong Institute for Drug Control, Guangzhou 510180,China)

[Abstract] Objective: To establish a method for determining jasminoidin in Longdan Xiegan Tablets. Methods: The column was Shimpack VP-ODS C18(4.6 mm×250 mm, 5 μm). The mobile phase was acetonitrile-water (13∶87). The flow rate was 1.0 ml/min. The detective wavelength was 238 nm. Results: The linear range was 0.102 4~0.716 8 μg. The average recovery was 99.58% with RSD of 1.24%. Conclusion: The method can be used for the content determination of jasminoidin in Longdan Xiegan Tablets.

[Key words] Longdan Xiegan Tablets; Jasminoidin; HPLC

龙胆泻肝片收载于《部颁标准中成药分册》第12册，由龙胆、栀子、黄芩等10味中药组成，具有清肝胆、利湿热的功效，临床用于肝胆湿热、头晕目赤、耳鸣耳聋等症状的治疗，效果较好。为更好地控制龙胆泻肝片的质量，本文对该制剂中栀子苷的含量测定方法进行了研究[1~3]。

1 仪器与试药

1.1 仪器

日本岛津LC-10AT vp型（SPD-10AT型紫外检测器，WMSP色谱工作站）；Branson SB 3200超声波清洗仪（上海，Branson）；Shimpack VP-ODS C18（4.6 mm×250 mm，5 μm）色谱柱。

1.2试药

栀子苷对照品（含测用，中国药品生物制品检定所提供，批号0797-200105）；甲醇、乙腈均为色谱纯（天津四友）；水（重蒸水）；龙胆泻肝片（市售）。

2 方法与结果

2.1色谱条件

色谱柱：Shimpack VP-ODS C18（4.6 mm×250 mm，5 μm）；以乙腈-水（13∶87）为流动相；流速为1.0 ml/min；检测波长为238 nm；进样量10 μl；理论塔板数按栀子苷峰计算应不低于4 000。

2.2对照品溶液的制备

精密称取经五氧化二磷减压干燥24 h的栀子苷对照品适量，加甲醇制成每1 毫升含 50 μg的溶液，即得。

2.3供试品溶液的制备

取本品10片，除去糖衣，研细，取细粉约0.2 g，精密称定，加乙醚30 ml，加热回流30 min，滤过，残渣用乙醚5 ml洗涤，将残渣与滤纸剪成碎片，挥尽乙醚，加甲醇50 ml，超声（400 W，40 kHz）处理30 min，滤过，滤渣及容器用甲醇20 ml分次洗涤，洗涤液与上述滤液合并，浓缩至10 ml，转移至50 ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。

2.4阴性样品溶液的制备

取缺栀子的龙胆泻肝片，按“供试品溶液的制备”项处理，制成阴性样品溶液。

2.5专属性检查

按上述色谱条件，吸取供试品溶液、对照品溶液、阴性样品溶液各10 μl注入色谱仪，测定。结果显示阴性样品溶液不干扰供试品溶液的测定。结果见图1。

2.6线性相关考察

精密吸取上述对照品溶液（含栀子苷51.20 μg/ml）2.0，4.0，8.0，10.0，12.0，14.0 μl，注入色谱仪，测定。以峰面积（Y）为纵坐标，进样量（X）为横坐标，绘制标准曲线。试验结果表明，栀子苷在0.102 4~0.716 8 μg范围内进样量与峰面积呈良好的线性关系。回归方程为Y=1.594 8×106X－2.03×103，r=0.999 9。

2.7精密度试验

精密吸取对照品溶液10 μl，重复进样6次，栀子苷峰面积RSD为0.89%。

2.8稳定性试验

取同一供试品溶液，分别在放置0，2，4，6，8，12 h后，依法测定，栀子苷峰面积RSD为1.07%。供试品溶液在12 h内稳定。

2.9重复性试验

取同一批号（批号为20070905）龙胆泻肝片6份，按供试品溶液的制备方法制备供试品溶液，依法测定，栀子苷平均含量为3.19 mg/g，RSD为1.21%。结果表明，方法重复性较好。

2.10加样回收试验

取本品（批号为20070905，含量为3.19 mg/g）6份，分别加入栀子苷对照品溶液（0.317 mg/ml）1 ml，按供试品溶液制备方法制备，依法测定，计算回收率，结果见表1。

2.11样品测定

取3批龙胆泻肝片按“供试品溶液的制备”项制备供试品溶液，依法测定。结果见表2。

3讨论

方中栀子为臣药，本文采用HPLC法对制剂中栀子苷含量进行测定，并就该测定方法进行了方法学的研究。研究结果表明，本法简便，灵敏、重现性较好，可用于控制本品的质量，为龙胆泻肝片质量标准的提高提供了实验资料。

[参考文献]

[1]中华人民共和国国家药典委员会.中国药典[S].一部.北京:化学工业出版社,2005.4.

[2]刘瑞新.HPLC同时测定龙胆泻肝丸中龙胆苦苷和栀子苷的含量[J].中成药,2007,29(8):1170.

[3]陈红英,蒋平,范耀.八正合剂中栀子苷的含量测定[J].中国药师,2006,9(1):17.

（收稿日期：2008-01-08）

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