氮杂萘衍生物Ⅱa对离体大鼠肺动脉收缩功能的影响

【摘 要】目的 研究Ⅱa对KCl和NA诱导的离体大鼠肺动脉收缩功能的拮抗作用。方法 采用离体血管实验法，观察Ⅱa对离体大鼠肺动脉舒缩作用的影响。结果 Ⅱa对KCl和NA诱导的离体大鼠肺动脉的收缩均有抑制作用（P＜0.01)。结论 Ⅱa既能抑制电压依赖性的钙通道激活剂KCl对血管环的收缩作用，又能抑制受体操纵性钙通道激活剂NA对血管环的收缩作用。

【关键词】氮杂萘衍生物Ⅱa；大鼠；肺动脉；血管收缩反应

【中图分类号】R285 【文献标识码】A 【文章编号】1008-6455（2012）01-0161-02

钙通道阻滞剂(CCB)是指能在离子通道水平选择性阻断Ca2+进入细胞内，从而降低细胞内的Ca2+浓度的一类具有广泛心血管药理作用的药物。地尔硫卓类是经典的L-型钙通道阻滞剂，除对心脏的作用外，还可扩张冠状动脉及外周血管，减轻心脏工作负荷、减少心肌耗氧量、解除冠脉痉挛，使冠脉流量增加和血压下降。临床可用于室上性心律失常、典型心绞痛、变异型心绞痛、扩张性心肌病、老年人高血压等[1～3]。氮杂萘衍生物Ⅱa（nitrogen heteronaphthalene derivativeⅡa，以下简称Ⅱa）是由河北师范大学化学与材料科学学院提供的一种新化合物，其结构与地尔硫卓类的结构近似。前期实验我们观察到Ⅱa对豚鼠心脏肌的复极化时间及离体大鼠胸主动脉舒缩作用均有一定影响，为进一步了解Ⅱa对离体大鼠肺动脉的舒缩作用有无影响，我们采用离体血管实验法，观察该化合物对离体大鼠肺动脉舒缩作用的影响，明确其药理作用，为今后开发与应用奠定基础。

1 仪器与试药

1.1 药品与试剂 去甲肾上腺素（NA）购自上海禾丰制药有限公司；氯化钾（KCl购自天津市标准科技有限公司；Ⅱa是由河北师范大学化学与材料科学学院提供；PSS液（pH 7.4）中的各成份均为分析纯 (浓度mmol?L-1)：NaCl 119，KCl 4.7，CaCl2 2.5，MgSO4?7H2O 1.17，NaHCO3 25，KH2PO4 1.18，EDTA 0.027，Glucose 5.5。

1.2 动物 健康雄性SD大鼠，200～220 g，购自河北医科大学动物实验中心（合格证号：906050）。

1.3 仪器 BL-420E+生物机能试验系统（成都泰盟科技有限公司）。

2 实验方法

2.1离体血管实验 取 200～220g的SD雄性大鼠，采用戊巴比妥40mg?kg-1腹腔注射麻醉，打开胸腔，迅速游离出心脏，立即移入4℃预冷、预氧饱和PSS液（在充分通 95%O2 和 5%CO2 的混和气体后，用pH计测pH值，并滴定至pH7.4）中，立即清除血污，仔细分离出肺动脉，并去除动脉周围的结缔组织，剪成 3.0-4.0 mm长的动脉环段，将血管环悬挂于20ml PSS液(37℃恒温，并持续通入95%O2和5%CO2 的混和气体)的浴槽中，连接张力传感器，记录血管环张力的变化。给予前负荷1 g，稳定60 min。每15 min换1次新鲜PSS液。以NA(10-6 mol?L-1)或KCl(60 mmol?L-1，)刺激肺动脉环，使血管环收缩，达到最大幅度后冲洗三次，使血管环恢复到刺激前的状态，平衡30 min后再次给于NA(10-6 mol?L-1)或KCl(60 mmol?L-1，)刺激血管收缩，两次收缩幅度相差10%以内，说明血管舒缩具有可重复性，继续以后的实验，反之弃之不用[4]。分别给予不同浓度的Ⅱa（10-7～3×10-5 mol?L-1），孵育15 min后，再观察NA(10-6mol?L-1)或KCl(60 mmol?L-1)引起的收缩反应，计算给药后收缩反应的抑制率（%）。溶剂(DMSO)对照组方法同上。

2.1统计学分析 NA和KCl诱发的血管收缩张力以x(__)±s（n=6）表示，Ⅱa或溶剂孵化前后激动剂引起血管收缩张力比较做配对t检验，数据资料用SPSS 16.0软件处理。

3 结果

3.1 Ⅱa对NA诱导的离体大鼠肺动脉收缩的抑制作用 溶剂孵化前后NA引起的血管张力变化无统计学意义（P＞0.05），各浓度Ⅱa（3×10-7～3×10-5 mol?L-1）孵化前后NA引起的血管张力变化有统计学意义（P＜0.01)。其抑制率呈一定量效关系。

3.2 Ⅱa对KCl诱导的离体大鼠肺动脉收缩的抑制作用 溶剂孵化前后KCl引起的血管张力变化无统计学意义（P＞0.05），各浓度Ⅱa（1×10-7～3×10-5mol?L-1）孵化前后KCl引起的血管张力变化有统计学意义（P＜0.01)。其抑制率呈一定量效关系。

4 讨论

细胞外高钾使平滑肌细胞膜去极化，主要是激活细胞膜上电压依赖性钙通道，促使Ca2+内流增加，[Ca2+]增加，而引起血管平滑肌的收缩。同时流入细胞内的Ca2+与位于肌浆网膜的兰尼定受体结合，促使肌浆网的Ca2+大量释放至胞浆内，即Ca2+引起的钙释放(C I C R), [Ca2+]进一步升高，血管收缩增强[5]。NA是α受体激动剂，属受体操纵性钙通道(ROC)激活剂，作用于血管平滑肌α1受体，促进钙通道开放，Ca2+内流增加和细胞内储存Ca 2+释放，使细胞内[Ca2+]增加，从而引起血管平滑肌收缩。本实验观察到Ⅱa对KCl和NA诱导的离体大鼠肺动脉收缩有明显的抑制作用，并呈现剂量－效应正相关，结合前期的实验观察，进一步推测Ⅱa可能是既作用于血管平滑肌细胞膜上的L-型电压依赖性钙通道，抑制了Ca2+内流，从而松弛血管平滑肌；又作用于血管平滑肌细胞膜上的α受体和（或）影响Ca2+调控，降低了细胞内Ca2+浓度，故我们得出结论：Ⅱa既能抑制电压依赖性的钙通道激活剂KCl对血管环的收缩作用，又能抑制受体操纵性钙通道激活剂NA对血管环的收缩作用，可能既有抑制受体操纵性钙通道，又有抑制电压依赖性钙通道的作用。其进一步的机制及对不同血管的影响，有待于今后的实验继续探究。

参考文献：

[1] 杨宝峰主编.药理学（第六版）.北京：人民卫生出版社，2007.203-204；279.

[2] 申文祥，牛锁成，党瑜华。地尔硫治疗缺血性心肌病患者心绞痛疗效观察。 临床医学，2008（12）13-15

[3] 蔡自力，亓令志，孙理社，张合民。静脉滴注地尔硫卓治疗不稳定型心绞痛31例疗效观察中国实用医药， 2008（7）111-112

[4] 钱健,朱建华. 参麦注射液对大鼠离体胸主动脉血管收缩反应的影响[J]. 浙江临床医学,2004(08)

[5] 吕宝璋，卢运，安明榜.受体学[M].安徽:安徽科学技术出版社，2000. 80-140