浅谈化学发光免疫分析方法与应用进展

[摘 要]随着社会技术的不断进步，在临床、环境、食品、药物检测等领域不断地被运用新技术。化学发光免疫分析法因为其具有选择性良好、灵敏度较高、分析速度较快而且设备简单等特点被广泛的应用。在实际应用中，进行测定的往往是一些复杂样品或者是低丰度分析物样品，而一些经典商品化的免疫分析方法不仅需要消耗的样品多、而且成本高、周期长，远不能满足需求，为此，建立一个低成本、高效率、高灵敏度的免疫检测方法非常的必要。化学发光分析方法因为满足与现实应用的要求，所以获得了广泛的发展，本文就化学发光免疫分析方法进行分析，并对其前景进行展望。

[关键词]化学发光免疫分析；免疫传感；快速检测

中图分类号：TP317 文献标识码：A 文章编号：1009-914X（2016）14-0049-01

近年来，化学发光免疫分析法备受人们的青睐，主要是因为此方法具有高灵敏度、强特异性、广适用面和设备简单等特点。在临床医学、食品药物等领域，此方法被广泛应用于抗原与抗体间的识别。生物分子的体积大、扩散率比较小，所加之对识别微电具有空间阻碍作用，所以受到传质速率和反应动力学控制的免疫反应速率一般都会比较低。传统的免疫分析方法需要的温育时间比较长，大大限制了样品测试的通量和适用范围。所以为了缩短免疫分析的时间，需要不断的进行技术创新，从而扩展化学发光免疫分析的应用范围。

一、化学发光免疫分析法

化学发光分析是一种利用化学反应产生的辐射光的强度来进行物质含量确定的分析方法。这种分析是化学发光系统和免疫反应的完美结合，主要是利用化学发光的相关物质对抗体或者是抗原进行标记，等到与需要进行测定的抗原或者抗体反应之后，再利用分离游离态化学发光物质的方法，使得加入到化学发光系统中的其他相关物产生化学发光，然后进行抗原或者是抗体的定量或者是定性的检测。在化学发光免疫分析中，主要使用4类标记物，分别是异鲁米诺及其衍生

物、过氧化物酶和碱性磷酸酶、鲁米诺和吖啶酯衍生物。在目前的化学发光免疫分析法中，以酶为标记物的化学发光是应用的主流。常用的标记酶是碱性磷酸酶和辣根过氧化物酶。利用酶来做标记物主要是因为酶具有相应的化学发光底物，在临床上的应用比较广泛。

在化学发光免疫分析方法中不可避免的会利用到标记技术，而标记技术是现代免疫分析的关键性技术之一。新的标记免疫分析技术，在目前的社会诸多领域中得到了广泛的应用，并且展示了非常不错的发展前景。在实际标记技术的应用中，纳米技术广泛的用于生物标记，主要是因为纳米粒子具有非常良好的生物相容性，而且具有信号放大的效果。在实际应用中，量子点就是一种半导体纳米颗粒，所以在发光免疫分析法中被大量的使用。

二、化学发光免疫分析法的应用

（一） 快速化学发光免疫分析方法

传统的免疫分析方法需要的时间比较长，而且由于时间的延长往往会导致免疫试剂吸附在管道的内壁上，这样就会造成不同测定间的信号交叉，对于测定结果的准确度具有严重的影响。为了实现免疫分析的高通量，克服传统方法的不足，可以通过利用外场的驱动或者是利用溶液来进行有效混合策略，以此来达到加快抗原或者是抗体等大分子的传质速率。在实际中，还可以通过提高整个反应体系的温度来进行免疫反应动力学的加速，这样也可以实现快速的免疫检测。

在提高传质速率的方法选择上，主要有四种备选方案，分别是改变电渗流、超声波驱动、电磁搅拌和电场驱动。通过这种提高传质速率的方法，可以有效的实现快速检测，一般在3分钟之内就可以完成检测工作。除去提高传质速率的方法，外力驱动的加速也会提高检测，在实际应用中，利用外力驱动的加速效果，可以在16分钟内完成整个测定分析工作。

（二） 多组分化学发光免疫分析方法

多组分化学发光免疫分析方法也是化学发光免疫分析方法的一种重要应用。在单个的分析流程中，同时实现多组分的检测，具有的优势非常显著。利用这种方法，不仅所需要的时间短、样品的消耗量比较少，而且分析的通量高，分析成本整体较低。这些优势都是免疫分析长期追求的目标，也是未来免疫分析的发展研究热点。多组分免疫分析模式主要有两种实践模式，分别是：多组分同时检测模式和顺序检测模式。在实际应用当中，同时检测模式往往会与空间分辨技术，还有阵列检测器同时进行结合检测，而顺序检测一般是在同一个时间期限内对多个组分进行分别检测。近年来由于安培免疫传感器阵列在多组分免疫分析中的广泛应用，多组分化学发光免疫分析的方法获得了非常快速的发展。多组分化学发光免疫分析法的广泛使用得益于其他技术的长足进步，也就是说多组分化学发光免洗分析的发展要建立在与其相关技术的发展基础上，所以这种技术在未来的发展潜力巨大。

（三） 高灵敏化学发光免疫分析方法

从过去的实践经验中得知，现有的检测手段其灵敏度和特异性都不是很理想，所以选择高灵敏度的检测方法越来越重要。纳米技术快速发展和在检测中的应用为实现化学发光免疫分析的高灵敏度提供了可能。就目前的情况而言，纳米粒子在生物分析中得到了广泛的使用，其信号放大的功效对于高灵敏免疫分析方法的构建非常有帮助。

通过研究发现不同粒径的纳米粒子可以增强鲁米诺过氧化氢体系的化学发光 ，在试验中，38 nm 粒径的纳米粒子的增强效果最为显著。通过实验，合成的特殊形状的不规则金纳米粒子，对鲁米诺过氧化氢化学发光体系的催化活性是普通纳米粒子的100倍。在试验中，将抗体固定在不规则金纳米粒子表面后发现，会形成夹心免疫复合物，这中复合物对于信号的放大，其效果更加的显著。也正是通过试验得知，将纳米粒子广泛应用于化学发光免疫分析中时，由于其信号放大的效果显著，测定分析的敏感性和准确度显著加强。

三、发展与展望

化学发光免疫分析方法在目前的生命科学领域、食品、药物的测定等方面被广泛的使用，而且随着我国对食品安全的重视程度不断加深，测定范围和深度肯定会逐渐增加。化学发光免疫分析方法其本身就具有成本低、操作简单、灵敏度较高、测定速度快等突出的优势，在未来的发展中这些优势会被充分的利用，化学发光免疫分析法的适用范围也会更加的广泛。再者，化学发光免疫分析法与技术的进步有着密切的关系，随着未来技术的不断进步，与化学发光免疫分析法相关的技术会得到不断地改进和发展，这对于化学发光免疫分析法来说，是一个强有力的助推力。

结束语

化学发光免疫分析方法因为其优势突出所以在目前的各个领域具有非常广泛的应用。在实际应用中，一定要不断的加深对此方法的认识深度，不断地提高利用此方法的技术，使这种技术更好的为现代的测定工作来服务。

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