参苓白术散对小鼠耐缺氧及抗运动性疲劳作用研究

[摘要] 目的 观察参苓白术散水提物的抗疲劳、耐缺氧作用。 方法 采用小鼠力竭游泳实验和小鼠常压耐缺氧实验，观察连续14 d灌胃给予参苓白术散水提物对小鼠的抗疲劳和耐缺氧能力的影响，并测定用药后各组小鼠负重游泳时间、耐缺氧时间、体内肝糖原贮备量、运动后血中尿素氮、血乳酸含量。 结果 参苓白术散水提物40.0、20.0 g/kg剂量均可显著延长小鼠常压耐缺氧时间和负重游泳时间（P < 0.05），显著降低小鼠血中乳酸及尿素氮含量（P < 0.05），显著增加小鼠体内肝糖原储备量（P < 0.05）。 结论 参苓白术散水提物能显著增强小鼠的抗疲劳和耐缺氧能力。

[关键词] 参苓白术散；耐缺氧；抗疲劳

[中图分类号] R289.5 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2013）03（b）-0009-03

参苓白术散原方出自《太平惠民和剂局方》，由人参、白术、茯苓、甘草、白扁豆、薏苡仁、山药、砂仁、桔梗、莲子肉等药味组成，具有益气健脾、渗湿止泻之功效，临床主要适用于脾虚湿盛证的治疗[1]。近年来，有关参苓白术散的研究主要集中在对消化功能促进、免疫功能提升等药理作用方面，对其提高机体耐缺氧及抗运动性疲劳能力方面的研究尚无报道。本研究观察了参苓白术散对小鼠负重游泳力竭时间、小鼠常压耐缺氧存活时间、运动后血浆尿素氮及血乳酸含量等方面的影响，现报道如下：

1 材料与方法

1.1 实验动物

ICR小鼠，清洁级，体重（20±2）g，由广州中医药大学医学实验动物中心提供，动物生产许可证号：SCXK（粤）2008-0019。

1.2 实验仪器与材料

参苓白术散方中所需人参、白术、茯苓、甘草、白扁豆、薏苡仁、山药、砂仁、桔梗、莲子肉等中药均由深圳市松岗人民医院药剂科提供；血乳酸试剂盒，血尿素氮试剂盒，肝糖原试剂盒均由南京建成生物工程研究所提供，批号分别为20110526、20110612、20110620；UV-5100型紫外可见分光光度计，上海元析仪器有限公司产品。

1.3 实验方法

1.3.1 参苓白术散水提物的制备 分别将人参、白术、茯苓、甘草、白扁豆、薏苡仁、山药、砂仁、桔梗、莲子肉等中药药材粉碎成粗粉，按质量比4∶4∶4∶4∶3∶2∶2∶2∶2∶2配方，以蒸馏水回流提取2次，合并滤液，减压浓缩呈按生药质量浓度计3.75、2.5、1.25 g/mL的参苓白术散水提物，置4℃冰箱贮存，备用。

1.3.2 参苓白术散对小鼠负重游泳力竭时间的影响 取小鼠60只，适应性喂养1周后，进行适应性负重游泳训练（于各鼠尾根部负荷其体重5%的铅丝，放入水深30 cm、水温25℃的水槽中游泳），每隔3 d训练1次，共2次，筛选出游泳时间较为接近的小鼠40只，随机分为四组，即参苓白术散高、中、低剂量组和空白对照组，每组10只。参苓白术散高、中、低剂量组小鼠分别以10 mL/kg的给药体积灌胃，给予40.0、20.0、10.0 g/kg的参苓白术散水提物，空白对照组小鼠灌胃给予同体积蒸馏水，1次/d，连续14 d。末次给药1 h后，于各鼠尾部负荷其体重5%的铅丝，进行负重游泳实验，观察并记录各鼠负重游泳力竭时间，即自小鼠入水至口鼻没入水下10 s无抬头的时间。

1.3.3 参苓白术散对小鼠运动后血浆中尿素氮含量的影响 动物分组及给药方法同“1.3.2”。小鼠末次给药30 min后，不负重置于水深30 cm、水温25℃的水槽中游泳90 min，休息60 min后立即摘眼球取血，肝素抗凝，2 500 r/min离心15 min分离血浆，用于测定血浆中尿素氮含量。

1.3.4 参苓白术散对小鼠运动后血中乳酸的影响 动物分组及给药方法同“1.3.2”。末次给药30 min后，于各鼠尾部负荷其体重5%的铅丝，置于水深30 cm、水温25℃的水槽中游泳10 min，休息20 min后立即摘眼球取血，用于测定全血中乳酸含量。

1.3.5 参苓白术散对小鼠肝糖原储备量的影响 动物分组及给药方法同“1.3.2”。末次给药30 min后，立刻脱颈处死，摘取肝脏，用滤纸吸干血迹后，称取约50 mg肝脏组织，用于测定肝糖原含量。

1.3.6 参苓白术散对小鼠常压耐缺氧能力的影响 动物分组及给药方法同“1.3.2”。末次给药30 min后，将各鼠分别放入盛有15 g钠石灰的250 mL广口瓶内，立即以瓶口涂有凡士林的瓶塞密封瓶口，记录各鼠常压耐缺氧存活时间（从放入瓶内到末次呼吸停止所需时间）。

1.4 统计学方法

采用SPSS 17.0统计学软件进行统计分析，计量资料采用均数±标准差（x±s）表示，采用方差分析和LSD-t检验，以P < 0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 参苓白术散对小鼠负重游泳力竭时间的影响

参苓白术散低剂量组小鼠负重游泳力竭时间略长于空白对照组，但差异无统计学意义（P > 0.05）；而参苓白术散高、中剂量组小鼠负重游泳力竭时间均显著长于空白对照组，差异均有统计学意义（均P < 0.05）。见表1。

2.2 参苓白术散对小鼠运动后血浆尿素氮、血乳酸含量的影响

参苓白术散低剂量组小鼠运动后血浆尿素氮、血乳酸含量均略低于空白对照组，但差异无统计学意义（P > 0.05）；而参苓白术散高、中剂量组小鼠运动后血浆尿素氮、血乳酸含量均显著低于空白对照组，差异均有统计学意义（均P < 0.05）。见表2。

2.3 参苓白术散对小鼠肝糖原储备量的影响

参苓白术散低剂量组小鼠体内肝糖原储备量略高于空白对照组，但差异无统计学意义（P > 0.05）；而参苓白术散高、中剂量组小鼠体内肝糖原储备量均显著高于空白对照组，差异均有统计学意义（均P < 0.05）。见表3。

2.4 参苓白术散对小鼠常压耐缺氧能力的影响

参苓白术散低剂量组小鼠常压耐缺氧存活时间略高于空白对照组，但差异无统计学意义（P > 0.05）；而参苓白术散高、中剂量组小鼠常压耐缺氧存活时间均显著高于空白对照组，差异均有统计学意义（均P < 0.05）。见表4。

3 讨论

中医认为，脾为后天之本，主运化，为气血生化之源，脾气虚，则受纳与健运乏力，四肢肌肉无所禀受，则四肢乏力；脾气旺盛，则谷气自旺，化源不乏，肌肉得温养，四肢则灵活矫健。参苓白术散方中人参、白术、茯苓为君，益气健脾渗湿；山药、莲子为臣，助君药健脾益气，兼能止泻；白扁豆、薏苡仁亦为臣药，助君药健脾渗湿；砂仁为佐药，醒脾和胃；桔梗宣肺利气、通调水道，又可载药上行，甘草健脾和中、调和诸药，共为佐使。诸药合用，共奏益气健脾、渗湿止泻之功效[1]。

机体在剧烈运动或缺氧时，肌肉组织的供氧不能满足体内葡萄糖有氧氧化的需要，大量葡萄糖则通过无氧酵解途径为机体提供能量，造成糖酵解产物乳酸在体内的大量堆积，引发一系列生化反应，进而造成运动性疲劳[2-4]。同时，因剧烈运动造成机体由糖或脂肪分解而获得的能量不足时，就会通过分解加蛋白质补充能量，进而造成蛋白质的代谢产物尿素含量的增加[5]。本研究结果显示，参苓白术散水提物可显著降低小鼠运动后的血中乳酸及尿素氮的含量，提示其可通过减轻小鼠运动后血乳酸堆积而产生抗运动性疲劳的作用，并可阻碍体内蛋白质分解供能的途径。

机体剧烈运动时，在体内肌糖原消耗的同时，肝糖原储备量也降低。因此，体内肝糖原储备量的高低是衡量机体抗疲劳能力强弱的重要指标[4]。本研究结果显示，参苓白术散水提物可显著提升小鼠体内肝糖原的储备量，提示其具有促进小鼠肝糖原储备的作用。

耐缺氧能力是间接反映抗疲劳能力的一项重要指标[6]，本研究以小鼠常压耐缺氧存活时间为观察指标，评价了参苓白术散对小鼠常压耐缺氧能力的影响，结果提示，参苓白术散可延长小鼠常压缺氧情况下存活时间。提示其可以增强小鼠机体携氧和利用氧的能力。

综上所述，参苓白术散具有延长小鼠常压耐缺氧存活时间、提高小鼠体内有氧代谢水平及抗疲劳的药理作用，而有关参苓白术散耐缺氧及抗运动性疲劳作用的具体药效成分及作用机制尚有待于进一步研究。

[参考文献]

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[2] ，胡露，张勇，等.五麦党黄汤对小鼠抗疲劳、耐缺氧和抗寒热能力的影响[J].西南国防医药，2012，22（1）：16-18.

[3] 胡彦武.东北刺人参茎耐缺氧及抗运动性疲劳作用研究[J].安徽农业科学，2011，39（6）：3230.

[4] 夏星，钟振国，廖林枝，等.刺梨提取物影响小鼠抗疲劳及耐缺氧能力的研究[J].时珍国医国药，2012，23（7）：1664-1666.

[5] 施溯筠，李秀国.榆黄蘑饮料对小鼠抗疲劳、耐缺氧和抗氧化作用的影响[J].时珍国医国药，2010，21（7）：1806.

[6] 彭亮，覃辉艳，赵鹏，等.肉苁蓉茶对小鼠抗疲劳和耐缺氧能力的影响[J].现代预防医学，2011，38（12）：2362-2364.

（收稿日期：2012-09-29 本文编辑：张瑜杰）