E-cad和PCNA在膀胱肿瘤中的表达及其意义

[摘要] 目的 探讨上皮钙依赖黏附蛋白（E-cad）和增殖细胞核抗原（PCNA）在膀胱肿瘤中的表达及其意义。 方法 采用免疫组化SP法检测1995～2010年76例膀胱恶性肿瘤和12例良性肿瘤，计算每例切片中癌细胞E-cad的异常表达率及增殖细胞核抗原阳性指数（PLI）。 结果 E-cad在76例膀胱恶性肿瘤和12例膀胱良性肿瘤中异常表达率分别为84.2%、16.7%，差异有统计学意义（P ＜ 0.05）。膀胱良、恶性肿瘤中PLI增殖指数分别为（35.85±8.20）%、（80.24±19.52）%，差异有统计学意义（P ＜ 0.05）。两者在膀胱恶性肿瘤中表达呈正相关（P ＜ 0.05）。 结论 E-cad与膀胱恶性肿瘤的浸润、转移有关，可作为预测转移潜能的指标，PCNA可作为恶性肿瘤增殖的指标。

[关键词] 上皮钙依赖黏附蛋白；增殖细胞核抗原；膀胱肿瘤；免疫组织化学

[中图分类号] R737.14 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2012）02（b）-0096-02

Expression and significance of E-cadherin (E-cad) and proliferating cell nuclear antigen (PCNA) in bladder tumor

GAO Fang1 HE Jinghua1 ZHANG Fengmei2 ZHANG Xiubin3 XU Hua2 LI Shengshui2

1.Department of Pathology, BOAI Hospital of Huanghua in Hebei Province, Huanghua 061100, China; 2.Department of Pathology, Integrated Chinese and Western Medicine Hospital of Cangzhou City in Hebe Province, Cangzhou 061000, China; 3.Department of Pathology, Nandagang Hospital in Hebei Province, Nandagang 061103, China

[Abstract] Objective To investigate the clinical significance of the expressions of E-cad and PCNA in bladder tumor. Methods Immunohistochemical study for E-cad and PCNA from 1995 to 2010 were performed on 76 cases of paraffin-embedded specimens of surgical carcinoma and 12 cases of mastoid tumor, the E-cad abnormal expression rate of cancer cells in slice of every patients and proliferating cell nuclear antigen positive index(PLI) were calculated. Results There were significant difference in E-cad and PCNA between the transitional cell carcinoma of bladder (84.2%) and mastoid tumor (16.7%). The positive expression of PCNA was significantly increased with stage and grade (P < 0.05), the PLI were (35.85±8.20)% and (80.24±19.52)% in the transitional cell carcinoma of bladder and mastoid tumor, difference had statisticod significance (P ＜ 0.05). But the positive expression of E-cad decreased with the stage and grade (P < 0.05). Conclusion E-cad has correlation with infiltration and transfer of bladder m alignant tumor, the expression of E-cad and PCNA can be used to estimate the metastatic potenciality and help for the adguvant treatment.

[Key words] E-cadherin(E-cad); Proliferating Cell Nuclear Antigen (PCNA); Bladder tumor; Immunohistochemstry

上皮钙依赖黏附蛋白（E-cadherin，E-cad）是一种依赖Ca离子的跨膜糖蛋白，它与胞浆相关蛋白β-连环素（β-catenin）等形成复合物而发挥正常的细胞黏附和信号传递功能，具有促进上皮细胞间相互黏附、保持组织结构完整性的作用，是肿瘤转移的抑制因素[1]。PCNA是反映细胞增殖活性的重要标志之一。有研究报道，PCNA不仅可反映肿瘤细胞的增生能力，而且还与肿瘤细胞的浸润和转移有关[2]。本文检测了结膀胱良、恶性肿瘤组织中E-cad和PCNA的表达，旨在探讨其与临床病理参数的关系及意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料

标本均取自1995～2010年河北省沧州中西医结合医院病理科存档的经10%中性甲醛固定，石蜡包埋的原发性膀胱肿瘤标本88例，其中良性肿瘤（内翻性状瘤）12例，恶性肿瘤（膀胱尿路上皮癌、膀胱腺癌及鳞状细胞癌）76例；其中，男54例，女34例，平均年龄为53岁；所有病例均为首发病例，经过病理复查，术前均未放疗或化疗。

1.2 检测方法

采用SP法进行免疫组化染色，4 μm连续切片，常规脱蜡水化，微波抗原修复，DAB显色，苏木素复染，用已知阳性片作阳性对照，PBS作阴性对照，E-cad和PCNA单克隆抗体均购自福州迈新公司（即用型）。

1.3 阳性结果判断

E-cad在正常情况下阳性染色定位于细胞膜，即连续的细胞膜染色，阳性细胞数 ≤ 90%为表达降低，出现胞浆和（或）胞核表达为异位表达[3]。异位表达和表达降低统归为异常表达。PCNA表达呈细胞核阳性，PCNA记数10个高倍镜不重复视野中1 000个肿瘤细胞中的阳性细胞数，阳性细胞数占癌细胞总数的百分数为阳性细胞表达率，即为PCNA标记指数（PLI）。

1.4 统计学处理

采用SPSS 13.0统计学软件，阳性率之间的比较用χ2检验，两变量之间的关系用Spearman等级相关分析表示，检验水准α=0.05。

2 结果

2.1 E-cad和PCNA在膀胱肿瘤中的表达

E-cad在膀胱恶性肿瘤和良性肿瘤中的异常表达率分别为84.2%和16.7%，表达水平显著降低，差异有统计学意义（P ＜ 0.05）（表1）。PCNA阳性棕黄色颗粒位于肿瘤细胞的胞核。膀胱良、恶性肿瘤中PLI增殖指数分别为（35.85±8.20）%、（80.24±19.52）%，差异有统计学意义（P ＜ 0.05）（表1）。

2.2 E-cad和PCNA表达的关系

随着E-cad在涎腺肿瘤中异常表达强度的升高，PCNA标记细胞数的百分率呈增高趋势。膀胱恶性肿瘤中E-cad异常表达组中PLI增殖指数为（81.55±20.12）%，明显高于正常表达组中PLI增殖指数（48.45±7.35）%，差异有统计学意义（t = 4.29，P ＜ 0.05）（表2）。经Spearman等级相关分析，E-cad的表达与PCNA的表达呈显著正相关（r = 0.575， P ＜ 0.05）。

3 讨论

3.1 E-cad的表达与膀胱肿瘤的关系

E-cad是钙黏附蛋白超家族最重要的成员之一，也是近几年研究最深入的一类钙黏附蛋白。E-cad被看作是上皮细胞选择性黏着剂，以维持组织结构的完整性和极性，E-cad表达下调或不表达是上皮细胞离散的分子基础，提示E-cad具有肿瘤侵袭和转移抑制功能[4-5]。文献报道，E-Cad低表达与卵巢癌、食管鳞状细胞癌等多种肿瘤分化程度、侵袭深度及转移范围密切相关[6-7]。本研究结果显示，E-Cad在膀胱恶性肿瘤中异常表达率显著高于膀胱良性肿瘤，差异有统计学意义（P ＜ 0.05），提示E-Cad 的异常表达可促进膀胱恶性肿瘤侵袭及去分化，可作为反应膀胱恶性肿瘤浸润及转移等生物学行为的一个重要指标。

3.2 PCNA的表达与膀胱肿瘤的关系

PCNA是DNA多聚酶的辅助因子，长36 kb，在增殖细胞S期广泛表达。其在判断正常与肿瘤细胞周期，检测细胞增殖分数及鉴别诊断上有重要意义[8]。近年关于膀胱癌中PCNA的研究表明，PCNA的阳性表达与膀胱尿路上皮肿瘤的发生、发展密切相关，其表达与肿瘤病理分级、临床分期关系密切，分化程度越低，PCNA的表达越强[9-10]。笔者的实验结果显示，PCNA膀胱恶性肿瘤（尿路上皮癌、腺癌及鳞状细胞癌）组织中PCNA表达水平明显高于膀胱良性肿瘤（内翻性状瘤），差异有统计学意义（P ＜ 0.05），与文献报道相一致，说明PCNA的表达可能与正常细胞的恶性转化有关，参与膀胱癌的发生发展、侵袭转移。检测膀胱癌中PCNA表达情况，可作为判断膀胱恶性肿瘤生物学行为及预后因素的重要标志。

3.3 E-cad和PCNA的关系

研究表明，E-cad的异常表达强度与PCNA的增殖活性密切相关。翁密霞等[11]在研究E-cad、PCNA在非小细胞肺癌中的表达及临床意义中发现E-cad的异常表达强度与肿瘤细胞的增殖活性表达呈正相关。本实验显示，在膀胱恶性肿瘤组织中随着E-cad异常表达率的增高，PCNA的增殖指数PLI亦增高，经Spearman等级相关分析二者表达呈正相关（P ＜ 0.05）。提示二者在促进肿瘤的发生发展中有协同作用，但二者相互作用机制尚有待进一步研究。

综上所述，在膀胱癌中联合检测E-cad和PCNA的表达，有助于评估肿瘤的恶性程度，从而对临床治疗及预后的判断提供依据。此外，常规检测PCNA增殖指数，指导临床合理应用抗癌药物和一些干预措施抑制癌细胞的增殖活性，将有可能控制恶性肿瘤的转移，减少复发，提高治愈率，改善患者的预后。

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[11] 翁密霞，吴翠环，杨秀萍. E-cadherin、CD44v6和PCNA在非小细胞肺癌组织中的表达及意义[J]. 癌症，2008，27（2）：191-195.

（收稿日期：2011-12-26）