松材线虫病免疫激活剂(疫苗)注射疫区松树预防枯死的初报

摘要：对浙江省松材线虫病发生区的湖州太湖旅游度假区仁皇山街道白雀村、绍兴市上虞章镇镇南村、舟山市淀海区白泉镇毛洋洲村、海盐县南北湖附近的月亮堡酒店周围等4个点，在5月下旬～6月中旬注射松材线虫病免疫激活剂（疫苗）取得显著效果，能有效阻止松材线虫病扩散蔓延，保护松树群免于枯死。

关键词：松树感染松材线虫病出现枯死；免疫激活剂注剂；能有效阻止松树群枯死

松材线虫病自1982年在我国南京发现以来，目前已扩散蔓延至江苏、浙江、安徽、福建、江西、山东、湖北、湖南、广东、广西、重庆、四川、贵州、河南、陕西等15个省（自治区、直辖市）的182个县级行政区，600余个乡镇，累计致死松树5亿多株，毁灭松林33.3万hm2，造成经济损失数千亿元。当前，疫情扩散蔓延的形势仍然十分严峻，并明显呈现出由东南沿海经济发达地区向内陆经济欠发达地区、低山丘陵少林区向高山自然保护区和重点林区蔓延发展的势头，对我国的0.33亿hm2松林构成严重威胁。松材线虫病的进一部扩散蔓延已严重威胁到黄山、张家界、庐山、武陵源、九华山等世界自然文化遗产的安全。中共中央政治局委员、国务院副总理回良玉在松材线虫病防治中做出重要批示（2009年4月21日）：“松材线虫病扩散的速度很快，给林业造成的损失巨大，对一些林区、风景名胜区和三峡库区的生态安全构成严重威胁，务必采取有效的措施，认真对待。要落实防治责任，创新防治机制，加大执法力度，实施科学防治，坚决遏制松材线虫病扩散蔓延的势头，切实保护好森林资源和国土生态安全”，2008年在浙西南山区海拔500m以上的高山的松树和毛竹遭受中国南方冰雪灾害之后，受雪压，被压倒、压断的松树没有及时清理，致使大量松褐天牛侵害、繁殖。致使多处挂牌和不挂牌的古松树成众枯死，这是近30年来庙宇、祠观、房前屋后第1次看到这些古松的枯死。为此，在有关大专院校、科研院所的院士、专家教授指导下，探索松材线虫病新的防控技术，研制出松材线虫病免疫激活剂（疫苗），在浙西南经过3年的试验成功后，2011年到松材线虫病的发生区嘉兴、湖州、绍兴、舟山等试验防治，并取得前所未有的效果，现将结果总结如下，以供参考。

1.材料与方法

1.1试验地概况

1.1.1湖州市试验地概况。湖州市试验地位于湖州市太湖旅游度假区仁皇山街道白雀村湖州中学后山傍。试验林为纯马尾松林，树龄35年生，平均胸径19cm，平均树高11m，每667m2株数58株。这片试验林自2002年发生松材线虫病以来，每年采取彻底清理病死松树、设置松墨天牛诱捕器和饵木堆等方法进行防治，但每年仍有一定量因病致死的松树。

1.1.2绍兴市试验地概况。绍兴市试验地位于上虞章镇镇南村附近一孤山上，形象馍头山，面积20hm2，周围为水田，40年生马尾松林，胸径15-35cm，树高15-25m，每667m2株数为50株左右。本试验地2005年发生松材线虫病之后，每年都有一定量马尾松枯死被砍伐，并将被砍伐后的树桩灌药用尼龙簿膜包裹砍伐口处理，一眼望去，满山树桩较多。试验时是沿山中间小道随机选取试验树。

1.1.3嘉兴市试验地概况。嘉兴市试验点位于海盐县南北湖附近，月亮堡酒店周围，40年生马尾松、黑松，以黑松为主，胸径10-20cm，树高10-20m，2006年发生松材线虫病，后经多方法防治，但每年出现不同程度的马尾松、黑松枯死，至今从未间断。在试验时，周围有少量枯死黑松，未清理。由于这块黑松林靠近海边，长年受海风影响，生长不茂盛，像小老头，木质坚韧，一般药剂很难注入防治。

1.1.4舟山市试验地概况。舟山市试验地位于淀海区白泉镇毛洋洲村，试验林面积近2hm2，整个试验山场座北朝南，约30-50年生，胸径30-50cm，树高15-25m的湿地松林群。本试验地在2002年就发生松材线虫病，后经防治，砍伐枯死松树，每年都出现不同程度的湿地松枯死，至今从未间断。试验地从山脚至山脊并排注射6株。

1.2选取标准株的试验方法

1.2.1湖州市标准株选取试验方法。在试验林选在中部，随机选取连片的52株供试验，并排6株，并逐株调查记载胸径、树高和用药量，并用红色油漆编号标记，根据松树胸径的大小，每株注射松材线虫病激活免疫剂（疫苗）1～2瓶（大的1株2瓶分2边注药，小的1株1瓶注药），共注药70支。另在试验林试药地块旁边随机选取45株松树作为对照，逐株调查记载胸径、树高，并用兰色油漆编号标记。

打孔和输液工具，由“丽水市绿谷生物药业有限公司”研究和改进的便携式输液瓶和注药打孔器。当松树未死之前，离地面约1.2m，采用便携式打孔器打孔，孔径7mm，深约4-5cm，倾斜角约45°。然后把便携式输液瓶的盖旋开，去掉铝箔封口，插入输液头，旋紧瓶盖，将盛药的小瓶输液管斜插入木质部，瓶底开一小孔，靠大气压力，任药液缓慢自流人树体，当药液流光，拔掉输液瓶，用泥巴自然封口，每隔1个月观察记载松树生长情况。

1.2.2绍兴市选取准株标试验方法。在试验林中，沿山间山脊小道两边随机选取两边健康马尾松林，计62株，并排6株注药，并逐株调查记载胸径、树高和用药量，并用红色油漆编号标记，每隔1个月观察记载松树生长情况。其它方法同上。

1.2.3嘉兴市选取准株标试验方法。在试验林沿月亮堡酒店后山随机选取50株马尾松、黑松供试验，逐株调查记载胸径、树高和用药量，并用红色油漆编号标记，每隔1个月观察记载松树情况。其它方法同上。

1.2.4舟山市选取准株标试验方法。在试验林中随机选取56株湿地松，路线从山脚至山背，一个来回，每行并排注射6株，并逐株调查记载胸径、树高和用药量，并用红色油漆编号标记，其它方法同上。

1.3试验用药（松材线虫免疫激活剂（疫苗））

试验用的松材线虫免疫激活剂（疫苗）由丽水市绿谷生物药业有限公司研制生产提供。该药剂有效成份为0.3%苦参碱（含苦豆碱），并加入发明者的天然专利产品活性成分，每瓶液制量为50ml。

2.结果与分析

2.1湖州试验点结果分析。

经2011年12底调查，试验区内的注射过松材线虫病免疫激活剂（疫苗）的马尾松，其中52株松树中发现死松树仅2株，（其中1株较小松树在试验地中部，大的1株在试验地路边东南面，另注药树的边缘，未注药的有5株较大松树枯死）；对照的45株松树设在注药树的边缘，未死亡。但试验林半径50m以内调查到枯死树1株，试验林半径50m以外的马尾松病死松树数量增多，东南面6株（包括注药死亡1株，），南西面7株，西北面8株，北边4株，枯死树形成1圈，这种现象很奇特。由此说明，注药区的左右50m范围内死树极少，仅1株，左右50m范围以外死亡极高，达20株。

2.2绍兴试验点结果分析。

经2011年12底调查，试验地内的注射过松材线虫病免疫激活剂（疫苗）的马尾松，仅1株死亡，试验区100m以内，未出现死亡，试验区左右100m以外有一定数量马尾松枯死。

2.3舟山试验点结果分析。

经2011年12月底调查，试验地范围内的注射过松材线虫病免疫激活剂（疫苗）的湿地松，无死亡，试验区50m处，1株死亡。

2.4嘉兴试验点结果分析。

经2011年9底调查，试验区内的注射过松材线虫病免疫激活剂（疫苗）的马尾松、黑松，死亡仅5棵，死亡率7.1%，而对照区，未注药的马尾松、黑松死亡率高达70%以上，形成鲜明的对比。

3.讨论与结论

经上述湖州、嘉兴、绍兴、舟山试验点说明，在松材线虫病发生区对尚活的松树、黑松注射过松材线虫病免疫激活剂（疫苗）各点分别为52、62、56、65株（一般50株连亩），每点使用免疫激活剂都为70支。到9月底调查，结果显示，各个试验点死树分别为2株、5株、1株、0株。在试验点的左右50-100m以内，不出现死树，试验点以外的左右50-100m以外出现一定数量马尾松、黑松枯死，这跟传统防治松褐天牛和松材线虫病的效果不一样，出现了防治新概念，就是出现了防治效果区间。这可能是松材线虫病免疫激活剂（疫苗）中添加了松树功能性物质，专利产品的免疫剂，激发松树自身免疫系统，增加松树自身免疫功能，促使松树功能性物质与树体内源激素结合，长期产生松树次生代谢物质，不断释放在空气中，迫使松褐天牛携带松材线虫不能接入健康松树，松树不会出现枯死，阻止松材线虫病扩散蔓延。①试验区左右50-100m以内，无死亡松树，这是一新的新概念防治效果现象，传统的防治效果统计法在这里难以计算，并受到挑战。②本试验说明，试验区左右50-100m以内，无死松树亡，说明注射防治667m2松林，就可以使0.27-1hm2松林当年不会受到松材线虫病感染，或者用砍伐枯死松树的钱来防治松树，就可以解决防治经费问题，这是一种相当经济有效的创新绿色防控松材线虫病技术；③本防治注射药剂操作技术简便，实用，易掌握，使用过程安全，方便。本作用机理独特，体现本草中药君、臣、佐、使的作用明确，药效显著。④松材线虫病免疫激活剂（疫苗）是一种生物灭活性生物药物，靶标作用明确，采用注射式注药安全、环保，不污染环境，对周围有益生物安全，对人类生存环境安全，本防治方法达到了目前防控林业有害生物松材线虫病的最高境界。建议松材线虫病防控领导专家进一步重视和试验推广，为扭转松材线虫病的严峻防控形势，挽救祖宗留下千百万古松，作出时代赋于我们的神圣使命。

本项试验得到中国工程院院士宋湛谦先生、“美国总统杯绿色化学挑战者”称号获得者，“863”计划项目主持人，中国农科院邱德文博士指导，特此致谢！