细胞采集器联合液基制片在尿液脱落细胞学中的应用

摘要：目的 对尿液标本作细胞采集器联合液基制片，以提高尿液细胞学诊断阳性率。方法 采用一次性细胞采集器联合液基法对60例有活检对照尿液标本制片并与离心沉淀法、单用细胞采集器法对照。结果 60例中离心沉淀法检出阳性数27例（阳性检出率45.00%），细胞采集器法检出阳性数38例（阳性检出率63.33%），细胞采集器联合液基制片法检出阳性数52例（阳性检出率86.67%）。后两组结果经统计学比较具有差异（P

关键词：细胞采集器；液基；尿；细胞学诊断

中图分类号：R730.21 文献标识码：A

尿路上皮性肿瘤为泌尿生殖系最常见的肿瘤，由于膀胱镜和输尿管镜检查的观察范围有限并为有创的检查，可能会遗漏位于难以窥视部位的肿瘤；影像学检查包括超声、X光、CT和MRI，虽能显示整个尿路的情况但不能明确病灶性质；肿瘤细胞代谢旺盛，即使在发病早期仍可有较多的癌细胞从病灶表面脱落，尿脱落细胞学检查是筛查泌尿系统肿瘤的一项重要方法，且不受肿瘤部位的限制，作者对60例尿液标本作细胞采集器联合液基制片以提高尿液细胞学肿瘤的阳性检出率，现报告如下：

1 资料与方法

1.1一般资料 收集2012～2014年我院门诊和住院患者尿液标本60例，其中男43例，女17例；年龄40～82岁，平均年龄64.15岁；所有病例均有不同程度血尿和（或）尿频、尿痛的症状；经手术及膀胱镜组织病理学证实为恶性肿瘤（膀胱：尿路上皮癌29例、低分化癌1例；肾：肾细胞癌4例、尿路上皮癌15例；输尿管：尿路上皮癌11例）。

1.2仪器与试剂 北京志恒达科技公司生产的一次性病变细胞采集器，液基制片试剂（厦门迈威）。

1.3方法

1.3.1嘱患者收集清晨新鲜尿液500ml以上，2h内送检；将每次尿液标本分为3份，1份按传统离心沉淀法制片，1份用细胞采集器法制片，1份用细胞采集器联合液基制片。

1.3.2离心沉淀法：将20ml标本置于离心管中，离心10min（3000r/min），弃上清液，用吸管吸取尿沉渣均匀涂片，潮干后置于95%乙醇固定15min，HE染色，阅片。

1.3.3细胞采集器法：将采集器的入液管插入200ml尿液，排除管置于大于标本量的空容器中进行抽吸与排液，反复多次抽吸排液至全部尿液排空可将直径>8μm的细胞滞留于滤膜上，而流体及大部分红细胞则被滤过，此时再顺时针打开浓缩器取出滤过膜涂片，95%乙醇固定15min，HE染色，阅片。

1.3.4联合方法：方法与步骤置1.3.3相同，取出滤过膜放入液基保存液中，行液基制片，HE染色，阅片。

2 结果

2.1 60例尿液脱落细胞学结果 传统离心法检出阳性数27例，阳性检出率45.00%；细胞采集器制片法检出阳性数38例，阳性检出率63.33%；联合方法检出阳性数52例，阳性检出率86.67%；细胞采集器联合液基制片阳性检出率高于单用细胞采集器法，差异有统计学意义（P

2.2不同方法检出肿瘤细胞的形态 ①离心沉淀法：细胞少而分散，背景不干净有大量红细胞干扰（见图1）。②细胞采集器法：细胞较多且集中，有轻度退变，背景较干净有少许红细胞（见图2）。③联合方法：细胞多并且分布均匀，背景干净除肿瘤细胞外还可见到尿液中的杆菌（见图3）。

图1 传统离心法 HE×10 图2 细胞采集器法 HE×10

图3 联合方法 HE×10

3 讨论

膀胱癌是泌尿系统最常见的恶性肿瘤，位居世界肿瘤第7位，发病率占癌症总数的3.2%，男性患者多于女性（男：女约为3.5：1），在60岁以上老年人中高发[1]，近年来有增加趋势，且早期诊断比较困难，膀胱镜检查为有创的侵入性操作，可能会引起尿路感染及血尿，并且在肾脏及上段输尿管肿瘤中意义不大。作者通过尿脱落细胞检查对60例不同部位的泌尿系统肿瘤的诊断认为：若正确留取足量的标本，及时规范收集细胞，不仅在膀胱肿瘤还是泌尿系统的其它部位肿瘤中都可显著提高尿脱落细胞学诊断的阳性率。

从三种不同制片方法比较来看：传统离心沉淀法取量少，特别在血尿的沉淀物涂片中有效细胞成分不仅少且背景中有大量红细胞干扰，容易漏诊。细胞采集器法现开展较成熟[2]，可将送检的尿液全部滤过，收集送检尿液中的所有细胞成分，滤过大量的红细胞，弥补了离心沉降法中标本浪费、细胞量流失及红细胞干扰的不足，但仍有不足之处：①若血尿标本中红细胞成分较多时亦可大量停留在滤过膜上影响诊断；②滤过膜较薄，很难将滤过膜上的细胞全部涂在玻片上；③在涂片的过程中涂片未干立即固定容易掉片，待涂片干燥后固定又易导致细胞退变影响诊断。细胞采集器联合液基制片法在尿液细胞学中体现出优越性，它建立在细胞采集器法基础上将送检尿液中所有有效细胞成分收集在滤过膜上，再通过液基制片的方法将滤过膜上的红细胞去除，使有效细胞成分保存并使细胞在液体中固定避免空气干燥造成的细胞退变[3]，并且液基制片使细胞在涂片中分布集中、均匀、无重叠、遮挡，缩小了阅片的范围，节省了阅片时间，减少漏诊，提高工作效率。

提高尿液脱离细胞学检查的阳性检出率，除了制片方法的选择外还应注意以下几点：①因为无痛性血尿是膀胱癌的主要征兆，应嘱患者尽可能的在血尿期留取标本，留取量约多越好并及时送检，如不能及时送检应放至于4℃冰箱中防止尿液中细胞退变；②注意尿液标本的留取方式，因导尿可损伤尿路上皮导致尿液标本中出现正常的成团脱落的上皮细胞，故对于导尿标本中的细胞应该认真鉴别；③制片过程中使用免疫组化防脱载玻片可以有效的使细胞黏附于玻片上，避免细胞在染色过程中的流失。

综上所述，正确留取足量的尿液标本，应用细胞采集器联合液基制片的方法可以最大限度的保留有效细胞成分并且去除红细胞等干扰因素，不仅在膀胱肿瘤还是泌尿系统的其它部位肿瘤中都可显著提高尿脱落细胞学诊断的阳性率。

参考文献：

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[2]吴家宁，杜芸，王珩.膜式细胞采集器在脱落细胞免疫组化染色中的

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[5]李新敏，古雅丽，李文才.液基细胞学染色质量控制对宫颈病变诊断的影响[J].诊断病理学杂志，2013，20（10）.

[6]王力，赵稳兴，赵玺龙，等.膜式和沉降式宫颈液基细胞学制片方法的比较研究[J].医药杂志，2011，23（04）.编辑/倪冰冰