石蜡切片脱蜡方式的比较

【摘要】 石蜡切片进行染色时脱蜡是影响染色效果的重要原因,其中脱蜡的温度及时间决定了脱蜡的效果,在实际工作中我们就这两项进行了摸索,本研究就笔者的体会作个总结。

【关键词】 病理学技术;石蜡切片;脱蜡

在病理技术工作中,石蜡切片无论是在进行常规HE染色或是其他特殊染色,首先都要进行脱蜡,脱蜡不净是影响染色效果的重要原因之一。而切片脱蜡的好坏主要取决于二甲苯的新旧、温度及时间,本科经多年实际操作,对后两个条件进行了多次摸索比较,得出一个满意的方法,现介绍如下。

1 资料与方法

1.1 材料 二甲苯,乙醇。

1.2 方法 石蜡切片入60℃烤箱烘烤,在烘烤切片的同时将无水酒精及少量二甲苯混合溶液放入烤箱中加热,30 min后将烤热的切片快速浸入二甲苯I中脱蜡1 min二甲苯II脱蜡1 min已加热的无水酒精及少量二甲苯混合溶液1 min无水酒精1 min95%乙醇I 1 min95%乙醇II 1 min90%乙醇1min85%乙醇1 min自来水水洗。

2 结果

通过对二甲苯温度及时间的改变,切片脱蜡更为彻底,(切片上除组织外原粘有蜡膜的位置已同玻片其他部位一样透明,组织形状清晰可见,将切片从水中提出时,水滴可以顺畅的流下)。脱蜡后无论是进行HE染色、免疫组化染色或是其他特殊染色,染色效果均比传统脱蜡方式达到的效果理想。

3 讨论

二甲苯及酒精作为常用试剂大量应用于病理工作中,尤其是脱蜡方面。在以往临床工作上,笔者普遍采取传统的脱蜡方式,既将石蜡切片入60℃烤箱烘烤30 min后浸入二甲苯I中脱蜡10 min 二甲苯II脱蜡5 min无水酒精洗去二甲苯5 min×2次95%乙醇3 min90%乙醇3 min85%乙醇3 min自来水水洗[1]。此方法不仅要求脱蜡时间长,导致组织易脱片,而且经常受外界温度影响造成脱蜡不净。本科在2003年通过对二甲苯温度的改变,既在烘烤切片的同时将二甲苯I放入60℃烤箱加温,30 min后将烤热的切片浸入已加热的二甲苯I中脱蜡1 min二甲苯II脱蜡1 min无水酒精I 1 min无水酒精II 1 min95%乙醇I 1 min95%乙醇II 1 min90%乙醇1 min85%乙醇1 min自来水水洗,使脱蜡时间大大缩短,但因该方法在操作过程中需要加热二甲苯,而二甲苯受热后极易挥发,对眼及上呼吸道有强烈的刺激作用,导致操作人员出现头晕、头痛等不适症状。为减少二甲苯对操作人员的伤害,本科从2003年年尾改用了现行脱蜡方式,通过对二甲苯温度、浓度及时间的改变,不仅缩短了脱蜡时间,降低了切片因脱蜡时间过长导致掉片,而且还大大减少了二甲苯受热挥发对操作人员的伤害。切片脱蜡后进行HE染色,核浆分明,染色清晰;进行特殊染色如肝穿标本做Masson染色,肝细胞呈玫瑰红色,而胶原纤维等呈鲜蓝色;而此类切片进行免疫组织化学染色时也可因脱蜡干净而减少组织的非特异性染色。需要注意的是,在使用该方法进行脱蜡时,尤其是对已进行过防脱处理的切片进行脱蜡时,最好让切片在各道试剂中进行多次涮洗,这样出来的脱蜡效果会更理想。

参 考 文 献

[1] 王伯,李玉松,黄高升.病理学技术.人民卫生出版社,2000,130,132.