白芍配伍桂枝作用体制浅论

白芍为毛茛科植物芍药的干燥根，具有养血敛阴等功效[1]。张仲景《伤寒论》中提及，白芍与桂枝配伍可以调和营卫，缓中和里[2]。近几年，多于白芍的抗炎作用研究比较多，但仍有很多问题不清楚[3]。本实验通过角叉菜胶造模大鼠胸膜炎模型，检测白芍与桂枝配伍的抗炎作用，并探讨其作用机制。

1材料与方法

1.1材料

1.1.1实验动物100只昆明系小鼠，雌雄各半，体质量（30±5）g，动物由锦州医学院实验动物中心提供，动物许可证号：SCXK（辽）2003～0007。

1.1.2药物及配制方法白芍、桂枝均购自广州致信中药饮片有限公司；弹性蛋白酶底物、磷酸二酯酶抑制剂、4-羟乙基哌嗪乙磺酸、角叉菜胶，均购自Sigma公司；丙二醛（MDA）测定试剂盒，购自南京建成生物工程研究所。白芍与桂枝饮片，加适量蒸馏水煎煮至沸腾，倒出煎液，放冷后，缓缓加入95%乙醇，4℃下放置24h，取上清液。赛多利斯电子分析天平、BIO-RAD550型酶标仪、紫外分光光度计、日立SCR20BA高速冷冻离心机。

1.2方法

1.2.1角叉菜胶大鼠胸膜炎造模及抗炎实验方法100只SD大鼠，雌雄各半，随机分为5组：对照组（生理盐水）、角叉菜胶组（1%角叉菜胶，0.05mL）、白芍组（白芍，100mg/kg）、桂枝组（桂枝，100mg/kg）、配伍组（白芍与桂枝1:1，100mg/kg）。各组给药30min后，分别注入0.05mL角叉菜胶。造模5h后，眼球采血检测。

1.2.2血浆丙二醛（MDA）含量的检测按照试剂盒说明书进行具体操作，于532nm波长，检测其吸光度。

1.2.3血浆弹性蛋白酶含量检测血浆弹性蛋白酶的检测方法，参考文献进行[4]。弹性蛋白酶标准品用PBS稀释（μg/mL），做出标准曲线，计算小鼠血浆弹性蛋白酶含量。

1.2.4中性粒细胞环磷酸腺苷-磷酸二酯酶（CAMP-PDE）活性检测中性粒细胞Camp-PDE活性影响的检测方法，参考张冰等的方法[5]。

2结果

2.1各组小鼠丙二醛（MDA）含量的变化与对照组相比，角叉菜胶组丙二醛含量明显升高（P<0.05）。与角叉菜胶组相比，白芍组和桂枝组，抑制角叉菜胶组丙二醛含量的升高（P<0.05）；白芍桂枝配伍组，明显抑制角叉菜胶组丙二醛含量的升高（P<0.01）。见表1和图1。

2.2各组小鼠弹性蛋白酶含量的变化与对照组相比，角叉菜胶组弹性蛋白酶含量明显升高（P<0.05）。与角叉菜胶组相比，白芍组和桂枝组，抑制角叉菜胶组弹性蛋白酶含量的升高（P<0.05）；白芍桂枝配伍组，明显抑制角叉菜胶组弹性蛋白酶含量的升高（P<0.01）。结果见图2。

2.3各组对中性粒细胞CAMP-PDE活性的影响

3讨论

发生炎症时，活化的白细胞促使活性氧自由基的生成，诱发组织细胞的脂质过氧化。丙二醛作为脂质过氧化过程中的主要产物，丙二醛增多，可以造成细胞毒性，使细胞功能受损。而且，丙二醛含量，通过作为机体内脂质过氧化程度的反应指标，间接反应细胞损伤的程度。本研究结果表明（见图1），致炎因子（角叉菜胶）可以使机体产生过量的氧自由基。白芍抑制模型小鼠血浆MDA含量的升高，表明白芍的抗炎作用与此有关。桂枝也抑制模型小鼠血浆MDA含量的升高，表明桂枝的抗炎作用也与此有关。而且，白芍与桂枝（1:1）配伍，明显抑制丙二醛含量的升高，可能抑制炎症细胞CAMP-PDE活性，从而抑制炎症细胞功能。弹性蛋白酶能够较为准确地反映该组织脏器损伤的严重程度[6]。本研究中结果表明（见图2），白芍与桂枝配伍，与抑制中性粒细胞弹性蛋白酶的释放有关。现代药理学证实，桂枝能够扩张血管，改善血液循环。白芍的主要活性成分为芍药苷，能够增强心肌对缺血缺氧的耐受力作用。白芍与桂枝配伍，寒温结合，具有启发心阳，以及益阴止汗的功效。本研究结果表明，白芍和桂枝配伍后，抗炎作用显著增强，两者具有协同作用。