7种中药抗耐多药结核分支杆菌的实验研究

摘 要 目的：耐药结核病再度成为医学界的难题。探索中药治疗耐多药结核病，寻找有效的抗耐多药结核菌的中药。方法：选择连翘、射干、黄芩、地骨皮、百部、夏枯草、鱼腥草7种中药，采用绝对浓度法进行实验室抗菌活性实验。结果：7种中药抗菌活性分别为连翘1:6、射干1:4、黄芩＞1:10、夏枯草1:4、地骨皮1:2、百部1:1、鱼腥草无作用。结论：7种中药抗耐多药结核分支杆菌的效果，从强到弱依次为黄芩、连翘、射干、夏枯草、地骨皮、百部、鱼腥草无作用。

关键词 耐多药结核病 耐多药结核分支杆菌 抗耐多药结核分支杆菌 抗菌活性

耐药结核病，尤其是耐多药结核病(MDR-TB)的治疗，再度成为医学界的难题。本文借鉴申慧亭等［1］中药化学成分抗结核分支杆菌的实验室研究方法，选择7种中药做体外抗耐多药结核菌活性研究。现报告如下。

资料与方法

试验药物的准备：称取7种所选用的中药，每种50g，置200ml蒸馏水中，浸泡30分钟，隔水煮沸30分钟，去药渣，继续隔水煮沸，直到浓缩成10ml，分装于无菌试管中，作好标记，置冰箱(4℃)保存备用。

试验用耐多药结核菌种的准备：将我院化验室从患者痰标本分离培养并进行鉴定的耐多药结核菌(耐H、R、S)，在接种前，用无菌0.5%吐温80生理盐水稀释成5×106CFL/ml，稀释时要充分地用无菌玻璃棒研磨，使结核菌充分混匀，制成菌悬液。要随用随配。不能在冰箱里保存。用过的器皿要立即进行消毒处理(高压蒸汽灭菌)。

实验用培养基的制备：称取天门冬素4.0g，枸橼酸2.0g，KH2PO4 0.5g，MgSO4 7H2O 0.5g，枸橼酸铁铵0.05g，甘油60ml，加入100ml蒸馏水中，加热溶解，待冷却后，加入600ml鸡卵，混匀后，分装试管，每管10ml，制成无药培养基。按1:2，1:4，1:6，1:8，1:10稀释上述7种中药，取中药原液及不同比例稀释后的中药液各1ml，分别加入已制备好的无药培养基中，制成含药培养基作好标记，并进行间歇消毒灭菌，无菌试验无细菌生长时，置冰箱保存备用。

试验方法：培养基制备好后，取制备好的耐多药结核分枝杆菌菌悬液0.1ml，均匀接种于培养基斜面上，并将接种好的培养基置平面摆好。待表面接种的菌液干后，再直立于试管架上，每个浓度接种2次，每次试验设立空白对照2个(即不加药的培养基)。接种好后，将管口塞紧，置35～37℃培养箱培养25～30天，在培养期间内，前10天，每3～4天观察1次，10天后，每天观察1次，待空白对照的菌落长到培养基斜面的2/3时，可终止培养，记录结果。

结 果

7种中药抗菌活性分别是连翘1:6，射干1:4，夏枯草1:4，地骨皮1:2，黄芩＞1:10，百部1:1，鱼腥草无作用。

讨 论

黄芩，性寒味苦，具有清热泻火［1］，除湿止血功效，临床上常用于肺热咳嗽，止血安胎等症。在体外抗耐多药结核菌试验中，将其浓缩液稀释10倍，培养基中仍无耐多药结核菌生长。本实验显示该药具有极高抗耐多药结核菌的作用。其抗结核菌作用可能与其所含黄酮类成分有关，详细的药理机制有待进一步深入研究。连翘，为木犀科落叶灌木连翘的干燥果实，含有齐墩果酸，6，7-二甲氧基香豆精，连翘酚，甾醇类化合物等，性微寒味苦，具有清热解毒，消肿散结，排脓抗菌功效。射干体外抗耐多药结核菌试验有较好的抑制耐多药菌生长的作用，在1:4稀释浓度的培养基中无细菌生长，其抗菌成份可能与射干苷有关。夏枯草有治疗肺结核，渗出性胸膜炎记载，现在常用于高血压的治疗。体外抗菌试验显示有一定抗菌作用，在1:4浓度的培养基中无细菌生长，其抗菌活性与射干相当，其抗菌效果可能是夏枯草苷，挥发油所起作用。地骨皮常用于肺结核的低热盗汗的辅助治疗。体外抗菌活性为1:2作用不及上述4种药明显。百部，为百部科多年生草本蔓生百部，对叶百部或直立百部的干燥块根，含多种生物碱，性微温味甘苦，能润肺止咳，杀虫，有广泛的抗菌作用，对肺炎球菌，痢疾杆菌，结核杆菌及某些致病性皮肤真菌均有抑制作用。主治风寒咳嗽，肺结核，阴道滴虫，牛皮癣等。同时它也是多种抗结核复方制剂如抗痨丸、抗痨散等的主要组成成份。体外抗菌试验仅原液培养基中无耐药菌生长，抗菌活性最低。与其药性记载有较好抗结核杆菌作用不甚相符，可能耐药菌株对此药已产生耐受即不敏感现象，也可能是该药在复合制剂中抗结核作用被增强，亦或其他原因，有待进步试验研究。鱼腥草对结核杆菌有无作用未见记载。体外抗菌试验，各浓度培养基中耐多药结核菌生长良好，与空白对照组生长现象近似，本试验显示其无抗菌活性。其鱼腥草素抗菌成份因干燥而失效有关，也可能是本品对结核菌确实无作用。

参考文献

1 申慧亭.7种中药化学成分抗结核分支杆菌实验室观察［J］.光明中医,2005,20(3):44-45.