大黄颗粒对大鼠的长期毒性试验研究

[摘要] 目的 观察连续灌胃给予大黄颗粒对大鼠产生的毒性反应，为临床合理应用提供依据。 方法 将120只大鼠按体重随机分为对照组和大黄颗粒高、中、低剂量组，每组30只，雌雄各半。各剂量组分别灌胃给予大黄颗粒10、5、2.5 g/kg（生药），对照组给予等体积纯化水，1次/d，连续给药26周，大鼠每周称重，给药结束时测试大鼠尿常规、血常规、血生化、脏器系数及病理组织学变化。 结果 高剂量组大鼠排稀便，体重增长缓慢，精神萎靡，尿蛋白阳性，血糖、氯离子轻度升高，肾小管上皮细胞轻度肿胀。中、低剂量组大鼠各项检测结果未见与用药相关的毒性变化。 结论 大黄颗粒长期连续灌胃安全剂量为≤5 g/kg。

[关键词] 大黄颗粒；长期毒性；大鼠

[中图分类号] R282.71 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2013）08（a）-0004-03

大黄药理作用广泛，《神农本草经》载：“大黄，荡涤肠胃，推陈致新，通利水谷，调中化食，安和五脏[1-5]。”现代药理研究表明其具有抗感染、抗病毒、抗肿瘤、治疗糖尿病等作用，既可内服，亦可外用，在临床上可大量使用[6-12]。据统计，全国8000多种中药制剂中有800多种含有大黄，大多数降脂减肥、排毒养颜类中成药均含有大黄[13]。目前对大黄长期服用的有关毒理学方面报道较少，为探讨其安全性，本项目进行了大黄颗粒长期毒性试验研究。

1 材料与方法

1.1 受试药物

大黄颗粒，由天津现代医药开发研究所提供。

1.2 试验动物

Wistar种大鼠（SPF级），雌雄各半，购自北京维通利华实验动物技术有限公司。

1.3 试验试剂

1.3.1 生化试剂 尿素氮（BUN）试剂盒、血糖（PG）、丙氨酸肌酐（CREA）等，上海丰汇医学科技有限公司生产。

1.3.2 目测八联试纸带（OCTO TEST PAPER） 广州花都高尔宝生物技术有限公司生产。

1.4 试验仪器

F-820血细胞计数仪、BECKMAN CX4 COULTERTM PRO全自动生化分析仪。

1.5 试验方法

Wistar大鼠，体重85～105 g，按体重随机分为高、中、低3个剂量组及对照组，3个剂量组的给药剂量分别为10、5、2.5 g/kg（生药），分别相当于人用临床剂量（0.1 g/kg）的100、50、25倍。每组30只动物，雌雄各半。每日定时灌胃给药1次，每周给药6 d，连续给药26周，给药体积为10 ml/kg；对照组给予等体积纯化水，给药时观察动物的一般状态，每周测体重1次。26周末给药后（每组雌雄各10只）及停药4周后（每组雌雄各5只）动物禁食24 h，用目测八联试纸法测定尿液。股动脉取血进行血常规、血生化及电解质检查。各组动物分别剖取脑、心、肝、肾、脾等脏器称重并计算脏器系数，制成HE染色切片，进行组织学检查。

1.6 统计学方法

应用SPSS 13.0软件处理数据，计量资料采用t检验，计数资料采用χ2检验，以P

2 结果

2.1 一般状况

给药期间，供试品高剂量组大鼠精神萎靡，排稀便，被毛晦暗，中、低剂量组动物被毛光泽，眼、鼻、耳、口、生殖器无异常分泌物，大小便正常，未见有系统毒性症状出现。停药恢复期间，高剂量组大鼠状态逐步恢复。

2.2 各组体重及摄食量的比较

给药26周，与对照组比较，高剂量组雌、雄动物体重增长缓慢，摄食量减少（表1）。

2.3 各组尿常规的比较

给药26周，高剂量组雌、雄大鼠尿蛋白阳性动物例数增多，其余各指标与对照相比差异无统计学意义（表2）。

2.4 各组血常规、血生化及电解质检查的比较

各剂量组各项血液学指标与对照组比较差异均无统计学意义；高剂量组动物GLU、Cl-较对照升高，余指标差异无统计学意义，中、低剂量组与对照组相比差异无统计学意义（表3）。

2.5 各组脏器重量及脏器系数的比较

各剂量组脏器重量及脏器系数与对照组比较差异无统计学意义（表4、5）。

2.6 病理组织学观察

各剂量组动物解剖后见胸、腹腔未见出血点及积液，主要脏器大体观察未见明显病变。组织学检查除高剂量组雌、雄动物均可见肾小管上皮细胞肿胀外，其余脏器未见与药物相关的病理变化。

3 讨论

大黄，大苦大寒，有泻热通腑、荡涤肠胃之功，临床常用于大便不通、积滞泻痢、里急后重及溏而不爽等症[14-15]，是临床常用的传统中药。大黄颗粒是利用现代工艺技术开发的一种具有泻下攻积、凉血解毒、清热泻火、利湿退黄、逐瘀通经等功效的中药冲剂，使用广泛，对其长期服用的毒性反应、安全剂量等，国内外少有报道，缺乏长期大剂量服用的安全性评估数据，本研究对大黄颗粒进行了较为完整的长期毒性评价。

本试验研究结果表明，长期给予高剂量大黄颗粒的雌、雄动物均被毛晦暗、排稀便、体重增长缓慢，考虑是大黄具有导泻作用造成动物腹泻，从而影响食物中营养成分的吸收所致。本实验提示大黄颗粒高剂量对动物无致死作用，但腹泻导致营养成分的流失而明显延缓了动物生长发育；高剂量组尿蛋白阳性数明显增多，且病理组织学检查发现动物肾小管上皮细胞肿胀，提示长期服用大剂量大黄具有一定的肾毒性，应密切监测肾功能；高剂量组血Cl-升高，表明其可能对电解质的分泌和吸收有影响；高剂量动物血糖轻度升高，考虑是大黄含有多糖成分，长期给药导致血糖升高，临床应监测血糖水平，尤其对糖尿病患者。试验期间中、低剂量组动物状态良好，被毛光泽，生长正常，体重增加，大小便颜色形状均未见异常，口、鼻、生殖器等未见异常分泌物，未见毒性反应及死亡，表明大黄颗粒中、低剂量对动物的生长发育无明显不良影响，无致死作用；尿常规、血常规、血生化、脏器重量及脏器系数检查，中、低剂量组与对照组相比均无差异，且动物解剖后胸腔、腹腔浆膜光滑，未见出血点及积液，心、肝、脾、肺、肾等主要脏器位置正常，大体观察未见明显病变，开颅后脑膜及脑未见异常，病理组织学检查各脏器未见明显病理变化，表明中、低剂量对动物的神经、泌尿、心血管等系统无明显的毒性作用。上述研究结果表明只要大黄颗粒给予剂量合理，长期服用即安全。

综上所述，大黄颗粒以剂量≤5 g/kg（相当于临床人用剂量的100倍）对大鼠长期灌胃，未见明显毒性反应，安全范围广。随着研究手段的进步，人们对大黄的认识会日趋深入。

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（收稿日期：2013-04-26 本文编辑：郭静娟）