抗环状瓜氨酸肽(CCP)抗体检测的临床应用

[摘要]目的：探讨抗CCP抗体对类风湿性关节炎（RA）早期诊断的作用，并与类风湿因子（RF）进行比较。方法：用ELISA法测定RA病人血清中抗CCP抗体，用免疫浊度法检测RA病人血清RF。结果：65例RA患者血清中抗CCP抗体的敏感性和特异性分别为67.7%、88.6%。结论：抗CCP抗体检测可用于RA的早期诊断。

[关键词]抗环状瓜氨酸肽抗体；类风湿性关节炎；类风湿因子

[中图分类号]R593[文献标识码]B [文章编号]1673-7210（2007）04（b）-103-01

类风湿性关节炎（rheumatoid arthritis，RA）是一种致畸性自身免疫性疾病。目前RA诊断主要依靠临床表现、X线检查，血清学诊断指标只有类风湿因子（RF），但RF特异性较差，近年发现抗聚角蛋白微丝蛋白（filaggrin）可提高对RA诊断的特异性，进一步研究发现，filaggrin中的稀有氨基酸-瓜氨酸是RA血清抗filaggrin相关抗体抗原决定簇的主要成分，用合成的环状瓜氨酸肽（CCP）作为抗原基质检测RA患者血清中抗CCP抗体，对RA的诊断具有

特异性。我们采用ELISA法对RA病人血清进行了抗CCP抗体检测，并与RF进行了比较，现报道如下：

1 材料与方法

1.1 研究对象

RA患者65例，年龄21～71岁，男性35例，女性30例。其他自身免疫性疾病35例（包括系统性红斑狼疮15例，干燥综合征9例，硬皮病8例，皮肌炎3例），年龄23～68岁，男性19例，女性16例。上述病人均按自身免疫性疾病诊断分型标准确诊。健康献血者40例，年龄21～45岁，男性25例，女性15例，来自市中心血站。

1.2 标本采集

所有研究对象空腹采集静脉血3 ml于试管中，待血液凝固后分离血清，置-70℃低温冰箱冷冻保存待用。

1.3 试剂与仪器

抗CCP抗体（IgG）购自欧蒙医学实验诊断有限公司，MK－II型酶联检测仪（Labsystems），ARRAY-360特定蛋白仪（Beckman Coulter）。

1.4 方法

1.4.1 抗CCP抗体检测酶标板孔用已修饰的精氨酸残基高度纯化合成CCP包被，检测血清标本用标本缓冲液1∶100稀释后加样，室温孵育60 min，洗板3次后加酶标记的IgG二抗，室温孵育30 min，洗板3次后加显色剂反应30 min后在405 nm波长下读取吸光度（A值）。每板同时做5点标准曲线，根据标准曲线计算各标本含量。

1.4.2 RF检测用ARRAY-360特定蛋白仪及配套试剂按仪器操作程序检测。

1.5 统计学分析

采用χ2检验，单因素相关分析结果。

2 结果

2.1 正常对照组检测结果

40例健康献血者抗CCP抗体的平均含量为（0.65±0.45）RU/ml，所有检测值位于0.06-3.8 RU/ml之间，均在正常范围上限（cut-off）5RU/ml以下。

2.2RA及其他自身免疫性疾病患者抗CCP抗体、RF阳性率（表1）

2.3 抗CCP抗体与RF间的相关性（表2）

3 讨论

类风湿性关节炎是常见的自身免疫性疾病，发病2年即可出现不可逆的骨关节破坏，因此RA的早期诊断并及时治疗对控制病情非常重要。目前对可疑RA患者最常做的血清学实验是RF检测，由于在健康人群和各种感染性疾病及其他自身免疫性疾病患者中也可检出，因此不是RA很特异的诊断指标。之后发现的抗核周因子、抗角蛋白抗体、抗聚角蛋白微丝蛋白抗体可在RA早期出现，对诊断RA具有高度特异性。新近认为，上述抗体在化学结构上具有相关性，它们的表位都含有瓜氨酸，采用CCP为抗原检测抗CCP抗体对RA的诊断有很好的敏感性和很高的特异性。本文65例RA患者血清中抗CCP抗体阳性为44例，35例非RA患者的血清中抗CCP抗体阳性为4例，抗CCP抗体对RA的敏感性和特异性分别为67.7%、88.6%。与RF相比，抗CCP抗体特异性较RF高（RF特异性为80%），但敏感性较RF低（RF敏感性为83%），抗CCP抗体与RF联合检测，可用于RA的临床检测及早期诊断。

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