超工频交变衰减磁场与组织处理

摘 要 方法：采用超工频交变衰减磁场(UFAWMF)对组织固定脱水透明浸蜡等处理过程进行了实验观察。结果：UFAWMF 组组织脱水指数(0.44831±0.04696)与常规组组织脱水指数(0.45327±0.05266)间无统计学差异(P>0.05)。而且，从外观上看，UFAWMF组组织外形变化不明显且有一定的柔韧性，而常规组有较明显的收缩且质地较硬。UFAWMF组制片及染色效果满意。明显优于常规组。结论：UFAWMF可以用于组织处理。

关键词 超工频交变衰减磁场 组织处理

材料与方法

标本来源与处理过程：取尸体心脏、肝脏、脾脏和肾脏组织各40块，每块约20mm×20mm×3mm，按脏器随机分为两组，即UFAWMF组和常规组，每组80块组织。UFAWMF组的组织处理缸置于JDM-1型退磁机(北方磁力公司，220W)中，而常规组采用《医疗护理操作常规》的处理方法。UFAWMF组的组织处理程序与时间分别为：10%福尔马林10分钟、85%乙醇5分钟、90%乙醇10分钟、95%乙醇10分钟、100%乙醇Ⅰ5分钟、100%乙醇Ⅱ10分钟、二甲苯10分钟、二甲苯蜡5分钟、石蜡Ⅰ5分钟、石蜡Ⅱ10分钟，总用时80分钟；常规组组织处理程序与时间分别为：10%福尔马林240分钟、85%乙醇90分钟、90%乙醇90分钟、95%乙醇90分钟、100%乙醇Ⅰ90分钟、100%乙醇Ⅱ90分钟、二甲苯30分钟、二甲苯蜡30分钟、石蜡Ⅰ60分钟、石蜡Ⅱ120分钟，总用时930分钟。

各组标本经福尔马林固定后，用吸纸吸干组织表面水分，按组分类编号并用分析天平(精度0.0001g)称重、记录后用等大镜头纸包裹进入各自的流程。完成100%乙醇Ⅱ脱水后，各组按编号随机抽取每种组织10块，分别用分析天平称重后记录，余标本继续进行透明浸蜡和包埋制片。操作时分别记录每缸结束温度。切片分别进行HE、AgNOR、PATH染色。

实验室条件：实验室室温18℃，相对湿度83.9%，液体初始温度为18℃。

统计学方法：将称取的质量换算求得组织脱水指数。组织脱水指数=组织脱水前后质量差/组织脱水前质量。然后，所得数据进行t检验，作组间差异性检验。

结 果

组织处理过程中液体的温度变化：UFAWMF组，10%福尔马林34℃、85%乙醇40℃、90%乙醇45℃、95%乙醇49℃、100%乙醇Ⅰ55℃、100%乙醇Ⅱ58℃、二甲苯60℃、二甲苯蜡无变化、石蜡Ⅰ65℃、石蜡Ⅱ65℃；常规组，10%福尔马林18℃、85%乙醇18.5℃、90%乙醇18.5℃、95%乙醇19℃、100%乙醇Ⅰ19℃、100%乙醇Ⅱ19℃、二甲苯19℃、二甲苯蜡65℃、石蜡Ⅰ65℃、石蜡Ⅱ65℃。

组织脱水程度：UFAWMF组脱水指数为0.44831±0.04696(X[TX-]±S)，常规组脱水指数为0.45327±0.05266，组间无统计学差异(P>0.05)。从外观上看，UFAWMF组组织外形变化不明显且有一定的柔韧性，而常规组有较明显的收缩且质地较硬。

制片及染色效果：UFAWMF组和常规组皆可制出2～5μm的平整的薄片。从染色方面看，UFAWMF组和常规组常规及特殊染色效果相同。免疫组化5-羟色胺的阳性细胞数及阳性程度明显优于常规组。

工作效率：UFAWMF组把组织处理用时从常规组的930分钟缩短到目前的80分钟，提高工作效率11.6倍之多。

讨 论

UFAWMF以往主要用于钢铁、煤炭、石油等工业。近年来由我们率先用于医学领域，早期用于动物实验研究，现今已用于临床治疗。

为拓宽UFAWMF的应用领域，我们将其用于组织的脱水固定透明浸蜡，结果表明UFAWMF对组织的处理过程有明显的加速作用。其机理可能是：①与UFAWMF所产生的电磁振荡有关。陈氏等报道，机械振荡有利于组织的固定脱水。近年也有高频电磁振荡(如微波)加速组织固定脱水透明浸蜡的报道。而UFAWMF具有两种频率的电磁振荡，一个是交变磁场频率(700Hz)，另一个是最高磁场强度的衰减变化频率(50Hz)，因此出现了振荡间歇，从而进一步提高了组织固定脱水透明浸蜡的效果。②电磁振荡产生的热量也是加速组织处理过程的影响因素。众所周知，提高温度可加快组织处理过程，但达不到满意效果，且单纯加温可使组织变脆、变硬或收缩变形，从而加大了制片和阅片难度。本研究中UFAWMF组较室温提高了16～47℃，提高了脱水等组织处理过程的效率。③电磁振荡能够影响液体的疏水性、氢键和范德华力，从而也加速了组织的处理过程。④电磁振荡能增强膜的通透性及提高极性分子对组织的穿透能力，基于异性相吸的原则，使溶剂和组织内部分子间快速交换，从而达到组织快速固定脱水透明浸蜡的目的。

UFAWMF处理组织的切片质量及染色效果与常规组相同。我们认为原因是UFAWMF在短时间内使组织完成了固定脱水透明浸蜡过程，保持了组织的外形和柔韧性，避免了常规加温处理或常规长时间处理造成的组织强烈收缩、变硬、变脆和变形以及减少了某些特殊成分的破坏。另外，微波固定的标本较小无法满足日常活检的需要，即使微波处理较大组织的脱水透明浸蜡过程用时65分钟，但标本固定需4～6小时，所以总的组织处理时间仍长于UFAWMF法(约3.8倍)。另外，福尔马林长期固定标本抗原易被封闭，而UFAWMF法固定时间短，减少了组织抗原封闭，5-羟色胺的免疫组化染色也证明了这一点。

总之，UFAWMF法处理组织效果能够达到了日常活检要求，与常规方法比可提高工作效率11.6倍之多，而且也可减少药品的挥发和用电量(或工作人员的劳动强度)，同时也减少了二甲苯等挥发性有机溶剂对工作人员身体的影响。