胃癌及癌前病变中PCNA和Caspase-3的表达及其与Hp感染的关系

【摘要】 目的 探讨PCNA和Caspase-3在胃癌及癌前病变中的表达及其与Hp感染的关系。方法 应用快速尿素酶试验与吉姆斯染色法将各种病变分为Hp感染阳性组和阴性组，应用免疫组化法对各种病变胃组织PCNA和Caspase-3的表达进行检测。 结果 ①胃癌及癌前病变组PCNA表达及Hp感染率明显高于慢性浅表性胃炎组( P

【关键词】胃癌；癌前病变；幽门螺杆菌(Hp)

胃癌的发生、发展是一个多因素、多步骤的过程，涉及到细胞增值和凋亡平衡异常等多方面机制。进年研究发现幽门螺杆菌（Hpylori） 感染与胃癌的关系密切。本研究应用免疫组化方法检测增殖相关基因蛋白PCNA及凋亡蛋白酶系统中关键酶Caspase-3在胃癌发生过程中的表达变化，探讨其在胃黏膜癌变过程中所起的作用及Hp感染致癌的可能机制。

1 资料和方法

1．1 一般资料 选择2008年6-10月来本院就诊的患者110例，包括慢性浅表性胃炎组40例，癌前病变组（萎缩性胃炎、肠上皮化生及不典型增生病变）40例及胃癌组30例，其中Hp阳性者63例,Hp阴性者47例,所有患者均经胃镜检查诊断并经病理组织学检查证实并未服用非幽体消炎药、抗生素及抑酸药。

1．2 方法

1．2．1 Hp感染检测 采用快速尿素酶试验及吉姆斯染色法,二者均阳性为Hp阳性，均阴性为Hp阴性，单一阴性退出试验。

1．2．2 免疫组织化学 兔抗人PCNA及Caspase-3多克隆抗体、SP染色试剂盒、DAB显色试剂盒等均购自北京中杉生物技术公司。试验严格按照SP染色试剂盒操作步骤说明进行，以PBS代替一抗为阴性对照,以已知阳性切片为阳性对照。

1．3 统计学方法 采用SPSS 12．0软件进行统计分析，相关因素的差异性比较采用χ2检验及确切概率法。

2 结果

2．1 PCNA检测结果以细胞核内出现明显的棕褐色颗粒者为阳性标记，Caspase-3蛋白阳性表达定位于胃黏膜上皮及胃癌细胞质,胞核或胞质显示为淡黄至黄棕色者为阳性标志，在组织切片中不显色为阴性。PCNA在浅表性胃炎-癌前病变-胃癌的病变过程中阳性率分别为45%、75%、83．3%，表达逐渐增加,在胃癌组表达最高（P

2．2 Hp在浅表性胃炎-癌前病变-胃癌组的感染率分别为30%、70%、76．67%，各组与慢性浅表性胃炎组比较HP阳性率差异有统计学意义(P

2．3 在同一病变组Hp感染阳性组PCNA、Caspase-3的表达高于Hp阴性组，在所有试验对象中63例Hp阳性组各基因的表达与阴性组比较差异有统计学意义（P

3 讨论

3．1 胃黏膜癌变过程中PCNA及Caspase-3的表达 PCNA是DNA聚合酶δ的辅助蛋白,是细胞增殖周期中DNA合成的必要蛋白，在G1期表达逐渐增加,S期达到高峰，G2/M期迅速降低,可作为S期的特异性标记，其含量多少可以反映细胞增殖程度[2]。本研究显示:PCNA表达从CSG到GC逐渐增加,提示GC演变过程中,胃黏膜细胞增殖程度逐渐增加,从而增加内外源性DNA受损机会,增加胃癌发生的危险性。Caspase-3可看作是调控胃上皮细胞凋亡最重要的执行者之一,它的激活能使许多细胞结构、细胞周期及DNA修复等相关蛋白或激酶失活,在细胞凋亡信号转导启动途径中起着关键性作用。本研究发现随着胃黏膜的癌变进展Caspase-3的表达下降，这与徐进等[2]研究一致，表明Caspase-3介导的细胞凋亡参与了胃黏膜的癌变过程。

3．2 胃黏膜癌变过程中PCNA、Caspase-3的表达与Hp感染的相关性 鉴于Hp与GC关系的大量研究,国际癌症研究会已把Hp列为GC的Ⅰ类致癌原。本研究显示Hp感染率随着癌变的进展而明显升高,HP阳性组PCNA的表达高于HP阴性组，表明HP感染促进细胞增殖,使黏膜处于高增殖状态,从而增加细胞DNA的损伤，这可能是HP感染引起胃癌的机制之一[1]。在同一病变中HP阳性组Caspase-3的表达高于HP阴性组,表明HP感染通过调控Caspase-3基因的表达而促进细胞凋亡。Hp感染引起胃黏膜细胞凋亡、增殖的机制仍不明确，可能与Hp产生的毒素、细胞因子、氧自由基等有关,还与bak、fas、p53等基因表达增强有关[4]。总之，Hp感染可能参与胃癌癌前病变乃至胃癌的发生,近来研究显示Hp感染促进胃黏膜细胞凋亡、增殖作用主要发生在胃癌癌前病变早期阶段。因此胃癌癌前病变早期阶段抗Hp治疗可能能预防胃癌的发生。

参 考 文 献

［1］ Preston MS，Pike MC，Ross RK，et al.Increased cell division as a cause of human cancer.Cancer Res，1990，50 (23):7415.

［2］ 徐进,文继航,郑晖,等.Caspase-3蛋白在胃癌及非典型增殖中的表达及其细胞凋亡的关系.湖南医科大学学报,2002，27(2):181-182.

［3］ 刘海峰,刘为纹,房殿春,等.幽门螺杆菌感染对胃粘膜上皮细胞增殖和凋亡的影响.中华消化内镜杂志，1998,15(2):91.