乳酸左氧氟沙星氯化钠注射液的无菌检查方法学研究

摘要：为了保证乳酸左氧氟沙星氯化钠注射液的无菌性，防止其药理作用受到影响，本文现结合具体实验来对该注射液的无菌检查方法进行讨论，以确定出行之有效的无菌检查方法，保证乳酸左氧氟沙星氯化钠注射液的无菌性以及无菌检查质量。

关键词：乳酸左氧氟沙星；氯化钠注射液；无菌检查；检查方法

从物理形态上看，乳酸左氧氟沙星氯化钠注射液呈蛋黄绿色，是一种澄明的液体，常用于医药医学中，主要功能是治疗人体重度呼吸系统、泌尿系统和消化系统感染；败血症、宫颈炎等的疾病。受医药功能限制，乳酸左氧氟沙星氯化钠注射液在配制和使用时必须要保持无菌操作，所以必须建立相关的无菌检查方法，以保证该注射液的药理有效性。下面，笔者结合我国2010版的《中国药典（二部）》的规定，对乳酸左氧氟沙星氯化钠注射液的无菌检查方法进行探析，并建立相关实验，对乳酸左氧氟沙星氯化钠注射液的无菌检查方法的适用性进行验证，详细如下。

一、乳酸左氧氟沙星的特点

乳酸左氧氟沙星是一种医学药物，物理状态为白色、微黄色结晶性粉末，味道较苦，无臭。它的医药化学特点是具有较强的广谱抗菌性，能对大多数生物细菌产生抵抗作用，尤其是肠杆细菌，该药物均对其具备有良好的抗菌活性作用。医药医学中，为了能更好的保证该药物对细菌的抵抗作用，相关研究人士建立了专门的乳酸左氧氟沙星氯化钠注射液无菌检查方法，利用这些方法来对乳酸左氧氟沙星的抗菌可靠性进行验证，并得出了相关结论。

二、检查方法分析

1、仪器和材料准备

HTY-2000型智能集菌仪、一次性全封闭集菌器林医疗器械厂）。乳酸左氧氟沙星氯化钠注射液、乳酸左氧氟沙星0.2g（以左氧氟沙星计）与氯化钠0.9g）；验证用菌种为人肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽抱杆菌、生抱梭菌、自色念珠菌、黑曲霉。培养基为硫乙醇酸盐流体培养基、改良马丁培养基、营养肉汤培养基、改良马丁琼脂培养基、营养琼脂培养基，pH7.0氯化钠-蛋白胨冲洗剂，氯化钠。

2、实验方法和实验结果

2.1菌液的制备

实验对象选择了接种后的葡萄球菌、加单细胞菌以及枯草芽孢杆菌等培养物，在实际实验时，实验人员将含有以上细菌的培养物放到了一份营养肉汤中，然后将内部含有接种生包梭菌的实验培养物放到了乙醇酸盐的培养基中，将温度控制在30-35℃之间，培养时间尽量不超过24h，按照实验实际情况，将培养物的培养时间合理控制在18-24h之间。

接下来，接种白色念珠菌的新鲜培养物至改良马丁琼脂培养基中，23e～28e培养24～48h，上述培养物用019%无菌氯化钠溶液制成含菌数小于100cfu#mL-1的菌悬液，接种黑曲霉的新鲜培养物至改良马丁琼脂培养基斜面中，23～28e培养5～7d，加入3～5mL019%无菌氯化钠溶液，将孢子洗脱。洗脱液用019%无菌氯化钠溶液制成含孢子数小于100cfu#mL-1的孢子悬液。

2.2培养基灵敏度检查

灵敏度检查时，具体操作步骤为：先选取9支内部装有硫乙醇酸盐流体的培养基，将9支培养基的装量都控制为12ml，然后给9支培养基接种上小于100cfu的葡萄球菌，颜色为金黄色；假单胞菌，颜色为铜绿色；枯草芽孢杆菌和生孢梭菌，每种菌类接种2支，剩下1支不接种，留作空白。然后将这9支培养基放在同等温度条件下培养5天，依次观察每一天的培养结果。

试验结果为：空白对照管无菌生长，加菌的培养基管均生长良好，灵敏度检查符合规定（详情见表1）。

三、检查方法验证

为了验证该种注射液制备方法的正确性，同时也为了验证乳酸左氧氟沙星氯化钠注射液的无菌性，文章现提出一种常用的无菌检查方法，即薄膜过滤法，并通过具体的实验来进行充分验证。

1、验证试验

方法一。首先，选取20瓶乳酸左氧氟沙星氯化钠注射液，利用封闭式薄膜过滤器对这20瓶注射液进行深层过滤。过滤时，在薄膜过滤器中加入容量为100ml的硫乙醇酸盐流体培养基，形成实验对照组。而在另一组培养器皿中，选取一体积对照组培养基体积容量相同的新培养基容器，然后在该培养基容器中加入适量和等量的试验菌，将这一组作为试验组。最后，当两组试验对象都完成了基本操作之后，调整好培养温度，将两组试验对象放在相等温度下培养3到5天，后采用PH值为7.0的无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液对两组培养对象进行冲洗，并在冲洗时过程中加入适量的硫乙醇酸盐流体培养基。观察两组试验对象的阴阳性，试验结果见表。

2、培养条件及结果观察

由试验观察结果可得到：含供试品各管的试验菌试验组在300mL/膜冲洗时各滤筒微生物均生长良好，阴性对照及样品澄清无菌生长，试验组有菌生长。说明在该检验条件下已去除乳酸左氧氟沙星氯化钠注射液的抑菌作用。

3、样品的无菌检查

取乳酸左氧氟沙星氯化钠注射液20瓶，采用封闭式薄膜过滤器过滤，用pH710无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液冲洗3次，每次100mL，与两筒中接种硫乙醇酸盐流体培养基，另一筒加入改良马丁培养基，按规定温度培养14d，逐日观察生长情况。结果供试品无菌检查阳性对照菌筒均在24h内正常生长，阴性对照均澄清呈无菌生长，无菌试验结果符合规定，证明所建立的无菌检查法科学、可靠，在该无菌检查条件下可去除药物的抑菌干扰。

四、结束语

综上所述，乳酸左氧氟沙星氯化钠注射液具有良好的灭菌、抗菌和杀菌作用，能对肠杆细菌产生抗菌活性，具有良好的医药用途。但由于当前乳酸左氧氟沙星氯化钠注射液的无菌性不太稳定，很容易受到某些因素的影响，所以在注射液配置过程中，务必要随时控制好注射液的抗菌稳定性，保障乳酸左氧氟沙星氯化钠注射液抗菌活性不会因其他因素影响而降低。而为了做到这一点，文章提出了一种薄膜过滤法，并结合具体实验，对该方法作了详细的论述，论证出乳酸左氧氟沙星氯化钠注射液的无菌性可以采用薄膜过滤法来进行检查，且具有良好的检查效果。

参考文献

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