时间：2022-03-20 12:11:07
摘要：目的 探讨蛛网膜下腔出血（SAH）后血浆蛋白激酶C（PKC）、神经元特异性烯醇化酶（NSE）变化规律及其与脑血管痉挛之间的关系。方法 用放免法测定30例SAH患者发病24 h、3 d、7 d、14 d、30 d血浆内PKC、NSE的含量，运用经颅多普勒（TCD）观察SAH患者大脑中动脉血流速度，并进行观测指标的相关性分析。结果 SAH后患者血浆内PKC、NSE的含量均明显高于对照组，两者于发病后24 h开始升高，7 d达到高峰，14 d开始下降，30 d恢复正常，PKC与NSE、大脑中动脉平均血流速度呈显著相关（r0.84，P
关键词：蛛网膜下腔出血；蛋白激酶C；神经元特异性烯醇化酶；血管痉挛
中图分类号：R743 R255.2 文献标识码：B 文章编号：1672-1349（2011）06-0691-02蛛网膜下腔出血（SAH）后继发性脑血管痉挛发生率较高，是导致SAH预后不良的重要原因。尽管国内绕SAH后脑血管痉挛（CVS）的发生机制进行了大量研究，但其病理生理基础仍未完全阐明【sup】［1,2］【/sup】。蛋白激酶C（PKC）是广泛参与细胞生命活动的一组酶，在血管平滑肌钙浓度变化以及平滑肌收缩过程中，包含PKC活性的变化【sup】［3］【/sup】。有证据表明【sup】［4］【/sup】，PKC激活剂可诱导血管造影时的血管痉挛，而PKC抑制剂可缓解实验动物模型的血管痉挛。本文探讨SAH后血浆PKC及神经元特异性烯醇化酶（NSE）变化规律，观察PKC与脑血管痉挛、神经元死亡之间的关系。
1 资料与方法
1.1 临床资料 观察组为SAH患者30例，均符合全国第四届脑血管病会议制定的诊断标准，均经CT或腰椎穿刺证实。患者拒绝外科手术或介入治疗。其中男14例，女16例，年龄39岁～80岁，平均63.2岁。按Hunt and Hess分级标准：Ⅰ级～Ⅲ级22例，Ⅳ级～Ⅴ级8例。对照组为同期住院的经颅多普勒超声（TCD）证实为脑动脉硬化但非脑血管疾病的老年患者20例，男8例，女12例，年龄41岁～82岁，平均62.8岁。两组性别、年龄等一般资料差异无统计学意义。
1.2 方法
1.2.1 治疗方法 观察组SAH患者常规给予镇静、止痛、止血、降温、降颅压、脑保护、补液维持水电平衡、补充维生素等对症治疗，有炎症表现者给予抗生素抗感染，有脑缺血及血管痉挛者给予钙离子拮抗剂，常规治疗4周。
1.2.2 标本采集 观察组分别在发病24 h、72 h、7 d、14 d、30 d采集清晨静脉血5 mL。对照组为入院3 d内采集1次静脉血。
1.2.3 血浆PKC和NSE浓度检测 采用放射免疫法，试剂购自北京东亚生物技术研究所，严格按照操作说明书进行操作、测定。
1.2.4 TCD检测 采用康泰医学系统公司生产的TDD-ⅡX2P型经颅多普勒彩超仪进行检测，入院后24 h、3 d、7 d、14 d、30 d选取大脑中动脉为观测目标。检测指标包括：收缩期流速（Vp）、舒张期流速（Vd）、平均流速（Vm）、脉动指数（PI）。
1.3 统计学处理 数据以均数±标准差（x±s）表示，采用方差分析、t检验及相关性检验。应用SAS软件进行统计学处理。
2 结 果
2.1 两组血浆PKC、NSE动态变化（见表1） SAH患者血浆PKC和NSE含量，在各时间点均高于对照组。其中PKC含量于24 h开始升高，7 d达高峰，14 d有所下降，30 d恢复正常。NSE于发病后迅速增高，3 d～7 d达峰值，之后迅速下降，于发病后14 d接近正常水平，30 d恢复正常。
表1 SAH患者血浆PKC、NSE含量动态变化（x±s）
2.2 两组TCD指标比较（见表2） SAH患者大脑中动脉的收缩期血流速度、舒张期血流速度和平均血流速度，于发病后24 h开始升高，并随时间延长流速逐渐增加，于发病后7 d达最高值，之后明显下降，30 d接近正常。观察组和对照组之间的脉动指数无统计学意义。表2 两组TCD指标比较（x±s）
2.3 SAH患者血浆PKC、NSE与脑血流速度相关性分析 观察组SAH患者血浆PKC与NSE呈正相关（r0.84，P
3 讨 论
血管平滑肌的收缩需要钙离子的参与、肌动蛋白和肌凝蛋白构象的变化，由此引起肌丝的滑行而出现肌肉的收缩，但其发生的分子机制及其中的氧化磷酸化过程仍为完全阐明【sup】［5，6］【/sup】。虽然SAH后血凝块释放出许多物质导致脑血管痉挛，但大量证据证明，氧合血红蛋白 （HbO【sub】2【/sub】）是脑血管痉挛的主要始动因素，而PKC可能是其主要的下游因子。PKC是一种钙易感的蛋白激酶，分几种亚型，如PKCα、PKCβ、PKCε等。有研究认为，应用PKC抑制剂Ro-32-0432可减轻HbO【sub】2【/sub】介导的血管痉挛，提示PKC可被上游的HbO【sub】2【/sub】激活，发挥对血管舒缩的调节作用【sup】［7］【/sup】。本研究观察发现，PKC于SAH后24 h即明显升高，7 d达到高峰，持续14 d仍维持在高水平，并且与TCD监测结果呈正相关，说明PKC参与了SAH后迟发性脑血管痉挛的发生。HbO【sub】2【/sub】可能通过以下机制诱导PKC激活：①SAH后一氧化氮（NO）、内皮素（ET）分泌发生变化，对PKC的负反馈抑制减少，导致PKC活性增加【sup】［8，9］【/sup】。②SAH后HbO【sub】2【/sub】不断产生，HbO【sub】2【/sub】的持续作用导致二磷脂甘油（DAG）生成增加，后者是强有力的内源性PKC活化剂。③HbO【sub】2【/sub】对正铁血红蛋白的氧化过程中产生自由基，后者激活PKC【sup】［10］【/sup】。激活的PKC使CPI-17（调节肌凝蛋白轻链磷酸酶的一种抑制蛋白）磷酸化，CPI-17使肌凝蛋白轻链磷酸化，最后出现平滑肌收缩、血管痉挛【sup】【/sup】［11，12］。
TCD技术可以测定某一血管内血流速度、血流方向，具有操作简便、安全无创、可重复和动态检查的优点，已广泛用于临床脑血流速度的检测。由于血管腔截面积与血流速度呈反比，所以可用TCD技术测量某一条血管内血流速度的改变以间接地反映血管痉挛的范围和狭窄的程度。血管痉挛在TCD上的表现主要为血流速度明显增快，特别是峰值血流速度增快。有研究【sup】［5］【/sup】报道TCD监测CVS的敏感性高达80%，对于中-重度CVS的敏感性为61.1%，特异性为100%。所以，TCD监测SAH后CVS的演变过程有很大的诊断价值。本研究发现，在蛛网膜下腔出血后24 h，大脑中动脉血流速度即开始发生变化，在3 d～7 d血流速度的峰值和平均值明显增加，尤以第7天为甚，14 d其收缩期流速仍显著高于对照组，30 d恢复正常，与有关文献报道的发生时间基本一致，按CVS发生的时程判断应是迟发性的脑血管痉挛。
研究结果进一步提示，SAH患者血浆PKC与神经细胞损伤定量生化标志物-NSE的改变明显相关。NSE作为神经元损害的定量生化标志物已为多数研究者认定，作为评价脑损伤的生化标志物，在昏迷、脑外伤、癫痫、脑血管病等病症中显示出重要的临床价值【sup】［13］【/sup】。研究显示SAH患者血浆PKC与NSE有明显相似的变化规律，并且与脑血流速度密切相关，说明在PKC升高和脑血管痉挛的过程中，伴随神经元损伤的增加，显示出PKC在SAH病理演变过程中重要的临床价值，提示PKC可能作为SAH急性期脑损害的生化指标应用于临床。
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作者简介：孙莉莉（1972―），女，毕业于青岛卫生学校，现工作于山东省青岛市海慈医疗集团（邮编：266033）；巩霞、郭秀云，工作于山东省青岛市海慈医疗集团。
（收稿日期：2011-02-18）