抑肽酶在肠I/R中对血清PLA2的影响

[摘要] 目的：应用肠系膜上动脉阻断模型，探讨肠I/R损伤对血清PLA2的影响，以及抑肽酶的肠保护作用机制。从而为抑肽酶在临床中的应用提供一定的理论依据。方法：24只日本大耳白兔随分组，空白对照组A组SMA不作阻断，B组为缺血/再灌注组，C组为抑肽酶治疗组，B、C两组SMA均作阻断。采用家兔肠系膜上动脉阻断（SMAO）模型，阻断时间为45min。C组阻断前5min静注抑肽酶30000KIU・Kg-1，随后以10000KIU・Kg-1・h-1维持至实验结束。B、C组在阻断前（Io）、阻断45min（I1），再灌注1h（R1）、再灌注2h（R2）各时点观察血清MDA、PLA2及肝脏组织形态学变化。A组在相应时点取样检测上述指标。结果：（1）C组PLA2在R2时血清值为：32.60±3.075μ，明显低于B组相应值：86.725±13.38μ（P

[关键词] 抑肽酶；缺血/再灌注损伤；磷脂酶A2（PLA2）

[Abstract] Objective:Study the effect of the intestinal ischemia reperfusion injury on the liver and another organ using SMAO model,To observe the protective effect of aprotinin on PLA2 during the intestinal ischemia reperfusion injury.Materials and Method:24 rabbits were randomly divided into three groups (n=8):Control group (A),SMA wasnot obstructed.ischemia/reperfusion group(B) and aprotiin group (C). SMAO model was prepared and obstructed time was 45min , and reperfusion for 2h. In the group C , aprotinin was injected into Vein 5min before clamping at 30000KIU・Kg-1, and was kept on at 10000 KIU・Kg-1・h-1,malondialdehyde (MDA),Phospholipase A2( PLA2)of serum were measured before obstruction ( I 0), at claming for 45min (I1)and 1h( R1), 2h(R2) after reperfusion respectively.The livet was examined for morphological changes.Results: PLA2 of serum at R2 in the group C were 32.6+-3.075u, were significantly lower than those of group A(P

[Key words] Aprotinin;ischemia/reperfusion of intestinal ;Phospholipase A2

应用肠系膜上动脉阻断模型，探讨肠I/R损伤对血清 PLA2的影响，以及抑肽酶的肠保护作用机制。从而为抑肽酶在临床中的应用提供一定的理论依据。

实验证明，它对肠缺血再灌注损伤的一定的保护作用，抑肽酶是否可以降低 PLA2的血清水平，我们作如下探讨。

1.材料与方法

1.1实验动物及分组

健康日本大耳白兔24只，体重2.0--2.5kg，雌雄不拘，随机分为三组（每组8只）：A组为假手术组，只分离肠系膜上动脉（SMA），不作阻断。B组为缺血再灌注组，SMA阻断45 min ，再灌注2 h。C组为抑肽酶处理组，阻断及灌注时间同B组，阻断前5 min一次静注抑肽酶（30000KIU・Kg-1），继以10000KIU・Kg-1・h-1速度持续输注直至实验结束。

1.2实验方法与步骤

术前动物禁食12小时，自由饮水，2％戊巴比妥钠（30mg・Kg-1）经耳缘静脉缓慢推注，麻醉动物，用DH―1408型动物呼吸机行机械呼吸，调节呼吸参数维持PETCO2 在4.67-6.0kpa范围。经股动脉插管，多道生理仪（Life Scope 9 NIHON KOHDEN 日本）监测MAP、CVP、HR、ECG和体温。腹正中切口开腹，由肠系膜静脉置管达门静脉处以备采血和血气分析。三组动物从肠系膜根部分离肠系膜上动脉（SMA），随机将实验动物分为3组，A组不作SMA阻断，B、C两组均于肠系膜根部阻断 SMA45min，再灌注2h，肠系膜上动脉阻断（SMAO）模型完成后暂时关闭腹腔。C组抑肽酶用法见前。三组动物在观察期间静注LR（20ml・kg-1・h-1）。实验结束前静注戊巴比妥钠100mg处死动物，迅速取肝脏组织，以备形态学观察。

1.3检测的主要指标

血清磷脂酶A2（PLA2） 用底物酶促反应法[3]测定血清PLA2水平。

C组及B组均在阻断前（I0）、阻断45min（I1）、再灌注1h（R1）和再灌注2h（R2）各时点采血检测上述指标，A组按相应时点采样和检测。

1.4统计学处理

各组数据以均数±标准差（x±S）表示，组间比较用方差分析，组内两两比较用q检验，以P

2.结果

2.1血清 PLA2（μ）的变化

C组 PLA2含量在 I1时高于A组（P0.05，表1）。C组 PLA2含量在R1、R2时明显低于B组（P

3.讨论

本实验研究表明：抑肽酶在肠I/R中的运用，不仅可抑制TNFα，而且还可减少PLA2的产生和释放，减轻炎症因子对组织的侵害，即达到保护肠粘膜的目的。依据如下：

3.1肠I/R可引肠道的再灌注损伤

肠道在MOF发病机制中占有重要地位，特别是肠缺血-再灌注损伤[1]。而当肠粘膜屏障受损后，肠道内的细菌或内毒素可经过淋巴或门脉途径侵入体循环或其它器官，引起全身感染和远隔离器官的损害。肠I/R损伤后肠粘膜屏障破坏导致肠道内细菌和内毒素易位，以及激活并释放的一些炎症介质，从而引发炎症的连琐反应，使得TNFα的表达增强，促进TNFα的产生和释放。而TNFα亦可激活PMN的产生和释放，IL―6、IL―8等产生增加[2]。而细胞因子在缺血时主要分布在各组织器官内，其在组织器官损害中具有重要的病理意义。

3.2抑制PLA2产生和释放

TNFα能诱导PMN在组织聚集、粘附、释放IL-6和IL-8等炎症介质[3]。细胞因子在缺血时主要分布在各器官组织内，在器官功能损害中具有重要的病理意义[5]。TNFα等细胞因子的表达是受PLA2调节的，PLA2在肠I/R时被激活，使TNFα等细胞因子表达增强[4]。肠粘膜中含有丰富PLA2，[5]在肠I/R期间因氧自由基的形成和细胞因子作用下，PLA2能被迅速激活，同时产生大量炎症介质，包括血小板激活因子（PAF）和花生四烯酸（AA）。PAF不仅直接参与肠粘膜损伤，而且还可激活PMN，造成组织和肠粘膜的损伤[9]。在本实验中，C组血清PLA2在R1、R2时比B组明显降低（P

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